摘要:目的觀察低頻電磁場(LFEMF)對(duì)三維環(huán)境中培養(yǎng)的人表皮干細(xì)胞(ESCs)增殖的影響,為LFEMF用于皮膚組織工程提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法取人包皮來源的ESCs作為種子細(xì)胞,利用Ⅳ型膠原快速貼壁法體外分離純化ESCs,并種植于膠原海綿和殼聚糖支架材料,外加LFEMF治療儀(場強(qiáng)5mT,頻率分別為1Hz、10Hz和50Hz)刺激ESCs(30min/d),用四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法(MTT)檢測支架材料細(xì)胞毒性,通過肉眼、HE染色后DAPI熒光核染色后鏡下觀察及掃描電鏡觀察ESCs生長情況,并收集培養(yǎng)2,7,10,14dESCs的DAPI核熒光染色數(shù)據(jù),用顯微圖像軟件分析細(xì)胞增殖數(shù)目,比較各時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞增殖的區(qū)別。結(jié)果LFEMF促進(jìn)ESCs增殖的作用在不同頻率組間的差異和兩種支架上培養(yǎng)的ESCs增殖情況的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〈0.01),10d后膠原海綿支架上細(xì)胞增殖較殼聚糖支架上的細(xì)胞明顯(P〈0.05),各頻率組LFEMF刺激均能促進(jìn)ESCs增殖,頻率不同,促增殖的效應(yīng)不一(P〈0.05)。結(jié)論膠原海綿可較好地作為體外培養(yǎng)ESCs的支架,在LFEMF干預(yù)下可實(shí)現(xiàn)ESCs體外三維環(huán)境中較快擴(kuò)增,LFEMF在皮膚組織工程中具有較大應(yīng)用潛力。
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