摘要：目的建立Ⅳ型膠原酶篩選模型,并運用此模型對中藥活性成分進行評價。方法利用Ⅳ型膠原酶特異性水解明膠釋放的末端氨基與2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)發(fā)生顯色,吸光度值可以衡量Ⅳ型膠原酶含量,優(yōu)化Ⅳ型膠原酶濃度、琥珀酰凝膠濃度、顯色劑用量及時間參數(shù)。結(jié)果確定了Ⅳ型膠原酶篩選模型的條件:5.0×10^-5 g/L酶溶液、20 g/L琥珀酰凝膠溶液、60μl 0.05%TNBS、顯色30 min,陽性藥鹽酸四環(huán)素在1.0 g/L下對該酶的抑制率是19.39%,并呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系,表明成功建立該篩選模型。應(yīng)用該模型篩選發(fā)現(xiàn),阿魏酸和川芎嗪具有明顯的抑制Ⅳ型膠原酶活性,而水楊酸和小檗堿則具有促進作用。結(jié)論Ⅳ型膠原酶的篩選模型成功建立并應(yīng)用到中藥活性成分篩選中,為快速評價中藥活性成分及其作用機制提供了有益參考。