摘要:為研究GhCAD6基因在轉(zhuǎn)基因棉花纖維中的表達(dá)及功能,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法獲得新陸早36號轉(zhuǎn)GhCAD6基因材料,經(jīng)過連續(xù)多代的選擇得到T6代植株材料,對該T6代材料植株葉片基因組DNA進行PCR檢測,確定其陽性植株,并對陽性植株葉片基因組DNA進行Southern雜交,結(jié)果發(fā)現(xiàn)GhCAD6以單拷貝的形式整合到受體棉花基因組中。利用熱硼酸-蛋白酶K法提取出棉花纖維RNA,結(jié)合實時熒光定量PCR建立了棉花纖維中GhCAD6基因的表達(dá)量的檢測方法,并測定了GhCAD6基因在不同發(fā)育階段棉纖維中的表達(dá)量。轉(zhuǎn)基因植株纖維中GhCAD6的表達(dá)量低于相同發(fā)育階段對照樣品。GhCAD6的表達(dá)量在轉(zhuǎn)基因植株和其對照在15DPA(開花后天數(shù))時變化趨勢不一致,其他時期大致相同。15DPA中GhCAD6基因的表達(dá)量的變化可能是造成轉(zhuǎn)基因棉花纖維品質(zhì)變化的主要原因。研究結(jié)果可為深入分析GhCAD6基因在改良棉花纖維品質(zhì)的作用機理提供理論依據(jù)。
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