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南方紅豆杉細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系優(yōu)化及動(dòng)力學(xué)研究

作者:徐志榮; 王婷; 婁佳蘭; 魏賽金 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)/江西省農(nóng)業(yè)微生物資源開發(fā)與利用工程實(shí)驗(yàn)室; 江西南昌330045

摘要:[目的]南方紅豆杉細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系優(yōu)化及動(dòng)力學(xué)模型構(gòu)建。[方法]以南方紅豆杉1年生枝條誘導(dǎo)產(chǎn)生的愈傷組織為材料,在優(yōu)化愈傷組織接種量、培養(yǎng)基初始pH、植物激素類型及配比的基礎(chǔ)上,分析南方紅豆杉懸浮細(xì)胞生長和紫杉醇積累的動(dòng)力學(xué)關(guān)系及主要營養(yǎng)成分的變化。[結(jié)果]適合南方紅豆杉懸浮培養(yǎng)的培養(yǎng)基為:B5+0.4 mg·L^-1 2,4-D + 0.3 mg·L^-1 NAA + 1.2 mg·L^-1 6-KT+30 g·L^-1 蔗糖,培養(yǎng)基最佳初始pH為5.8,最佳接種量為0.09 g·mL^-1 。在1個(gè)培養(yǎng)周期內(nèi),培養(yǎng)液中的糖、磷元素,銨態(tài)氮、硝態(tài)氮在細(xì)胞培養(yǎng)的第18天基本被消耗完全或保持不變;動(dòng)力學(xué)擬合表明,南方紅豆杉細(xì)胞懸浮培養(yǎng)生長符合Logistic生長模型,最大比生長速率為0.143 65 d^-1 ,底物消耗和紫杉醇合成可用Luedeking-Piret模型描述,懸浮細(xì)胞生長與紫杉醇積累屬于部分生長偶聯(lián)型。[結(jié)論]南方紅豆杉細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系優(yōu)化后,通過模型的回歸擬合,獲得了反映南方紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)的動(dòng)力學(xué)參數(shù),試驗(yàn)所構(gòu)建的發(fā)酵動(dòng)力學(xué)模型在一定程度上揭示了南方紅豆杉細(xì)胞產(chǎn)紫杉醇代謝過程的特征。

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