時(shí)間：2024-02-10 16:37:59
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關(guān)鍵詞：光遺傳學(xué)；神經(jīng)回路；動(dòng)物行為學(xué)；
作者簡(jiǎn)介：陳婷(1990-)，女，湖北人，碩士，研究方向：術(shù)后認(rèn)知功能障礙的動(dòng)物模型行為學(xué)研究。作者簡(jiǎn)介：張宗澤
光遺傳學(xué)被《Naturemethods》評(píng)為2010年度生物技術(shù)［1］。光遺傳學(xué)技術(shù)是將光學(xué)和遺傳學(xué)技術(shù)相結(jié)合，利用病毒載體，將微生物視蛋白基因引入到載體動(dòng)物的腦組織，采用不同波長(zhǎng)和頻率的光進(jìn)行照射，通過(guò)刺激光敏感蛋白開啟或關(guān)閉特定細(xì)胞類群或特定神經(jīng)元的活動(dòng)進(jìn)而調(diào)控其功能，從而控制動(dòng)物行為［2］。本文就光遺傳學(xué)技術(shù)的基本方法及應(yīng)用，以及其在神經(jīng)-精神疾病動(dòng)物模型中如何調(diào)控神經(jīng)回路作一綜述。
一、光遺傳學(xué)技術(shù)
近來(lái)，研究者一直致力于不同行為的神經(jīng)回路研究，探討其投射連接，觀察通過(guò)調(diào)控某一類神經(jīng)元活動(dòng)后的相應(yīng)行為學(xué)表現(xiàn)。而電刺激和藥理學(xué)的方法可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確，光遺傳學(xué)技術(shù)具有目的性強(qiáng)、低損傷性、高時(shí)空分辨率和遺傳特異性等特點(diǎn)，近年來(lái)在神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域的生物學(xué)機(jī)制的研究中得到了廣泛應(yīng)用。光遺傳學(xué)技術(shù)可包括下述幾部分，對(duì)此作簡(jiǎn)單介紹。
1光敏感蛋白
生物體內(nèi)存在著一類可以感受不同波長(zhǎng)光的刺激，并對(duì)該光學(xué)刺激產(chǎn)生一系列效應(yīng)的膜蛋白，即視蛋白。
目前，Ⅰ型視蛋白包括：細(xì)菌視紫紅質(zhì)(Bacteriorhodopsin，BR)，鹽視紫紅質(zhì)(Halorhodopsin，HR)，通道視紫紅質(zhì)(Channelrhodopsin，ChR)。ChR在萊茵衣藻(Chlammydomonasreinhardti)中發(fā)現(xiàn)，為藍(lán)光激活的陽(yáng)離子通道蛋白，作用為陽(yáng)離子內(nèi)流，使細(xì)胞膜去極化。2005年，ChR2首次應(yīng)用于光控制神經(jīng)元活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)中。Ⅱ型視蛋白OptoXR，為視紫紅質(zhì)G蛋白偶聯(lián)受體的嵌合體。是一種光敏感與G蛋白偶聯(lián)的膜受體，G蛋白又稱鳥苷酸結(jié)合蛋白，與G蛋白偶聯(lián)的膜受體有很多種，如M膽堿能受體、多巴胺能受體等，可參與細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，還可調(diào)控如谷氨酸等神經(jīng)遞質(zhì)的信號(hào)傳遞功能［3］。
2光敏感蛋白的表達(dá)
光敏感蛋白，是光遺傳學(xué)的一種關(guān)鍵工具，在腦內(nèi)諸多神經(jīng)元中穩(wěn)定表達(dá)。隨著生物工程技術(shù)的發(fā)展，現(xiàn)在已經(jīng)研發(fā)出許多將光敏感基因運(yùn)載至細(xì)胞或神經(jīng)元，并有效表達(dá)成光敏感蛋白的病毒載體。如腺相關(guān)病毒AVV、慢病毒、Cre-Loxp重組酶系統(tǒng)和各種轉(zhuǎn)基因小鼠等。
3光刺激和信號(hào)記錄
光刺激系統(tǒng)有光列二極管(LED)等。體外實(shí)驗(yàn)中，腦片電生理-全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄神經(jīng)元放電信號(hào)，觀察其光電流特征；在體實(shí)驗(yàn)中，在體立體定向注射病毒載體，經(jīng)過(guò)10-14天待其充分表達(dá)后，構(gòu)建光神經(jīng)界面，植入光纖并固定，行在體光刺激，細(xì)胞膜內(nèi)外離子差產(chǎn)生，膜電位發(fā)生變化，記錄神經(jīng)元的放電情況［4］。與光調(diào)控相匹配的解讀體系包括電生理記錄，功能磁共振成像或定量的動(dòng)物行為學(xué)分析等。
二、光遺傳學(xué)技術(shù)在神經(jīng)科學(xué)研究中的應(yīng)用
通過(guò)光遺傳學(xué)技術(shù)可將光敏感通道蛋白表達(dá)在特定的細(xì)胞，用于突觸可塑性、神經(jīng)系統(tǒng)的疾病治療、動(dòng)物行為學(xué)、神經(jīng)回路研究等多方面。
1突觸可塑性的研究
樹突棘是大腦神經(jīng)元接受和傳遞信息的重要結(jié)構(gòu)，是形成突觸的關(guān)鍵部位，在突觸可塑性中發(fā)揮重要作用。90%以上的興奮性突觸存在于樹突棘頭部中，應(yīng)用光遺傳學(xué)技術(shù)可以同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樹突棘的信號(hào)，突破了停留在單個(gè)突觸水平的研究。Takahashi等［5］通過(guò)對(duì)嚙齒類動(dòng)物海馬區(qū)錐體細(xì)胞的上百個(gè)樹突棘進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)臨近的樹突棘在自發(fā)活動(dòng)中會(huì)趨于同步化，使得輸入信號(hào)整合，成為動(dòng)作電位輸出。
也有研究應(yīng)用光照激活星型膠質(zhì)細(xì)胞上表達(dá)的ChR2能促發(fā)谷氨酸遞質(zhì)釋放，可激活神經(jīng)元的AMPA受體［6］，而AMPA受體與突觸可塑性有關(guān)。這些研究表明通過(guò)選擇性調(diào)節(jié)特異性神經(jīng)元或神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量，光遺傳學(xué)技術(shù)在突觸可塑性研究中有較大應(yīng)用前景。
2神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療研究
光遺傳學(xué)技術(shù)除了檢測(cè)大腦中癲癇發(fā)作的起始點(diǎn)外，還用于研究嚴(yán)重癲癇持續(xù)狀態(tài)的持續(xù)或中止［7］。Sukhotinsky等［8］利用光遺傳學(xué)技術(shù)揭示了海馬興奮型神經(jīng)元在氯化鋰-匹羅卡品誘導(dǎo)大鼠急性癲癇中的作用。
Alilain等［9］利用光遺傳學(xué)技術(shù)將ChR2表達(dá)于膈肌運(yùn)動(dòng)細(xì)胞群，光照刺激下，頸部脊髓損傷的動(dòng)物可以恢復(fù)呼吸運(yùn)動(dòng)。光遺傳學(xué)技術(shù)也為帕金森癥的神經(jīng)機(jī)制提供了新的見解和思路。
3動(dòng)物行為學(xué)和神經(jīng)回路研究
動(dòng)物交際行為學(xué)測(cè)試中，通過(guò)光遺傳學(xué)技術(shù)可明確下丘腦泌素/進(jìn)食素在特定情境中扮演的角色［10］。Huber等［11］利用光遺傳學(xué)技術(shù)將ChR2表達(dá)在小鼠初級(jí)感覺(jué)皮層-桶狀皮層神經(jīng)元中，利用藍(lán)光照射并結(jié)合獎(jiǎng)勵(lì)進(jìn)行行為學(xué)訓(xùn)練的方式，藍(lán)光照射時(shí)，小鼠向左轉(zhuǎn)，給予水喝，作為正確識(shí)別的獎(jiǎng)勵(lì)，研究小鼠行為與光照之間的關(guān)系，證實(shí)小鼠獎(jiǎng)賞記憶行為準(zhǔn)確率與藍(lán)光照射有較強(qiáng)的相關(guān)性。
神經(jīng)回路是神經(jīng)細(xì)胞、分子活動(dòng)和腦整體活動(dòng)的連接橋梁。運(yùn)用光遺傳學(xué)技術(shù)，在動(dòng)物中實(shí)現(xiàn)了對(duì)神經(jīng)元和突觸的高時(shí)間分辨率、高精確度的光學(xué)調(diào)控，為動(dòng)物行為學(xué)的神經(jīng)回路的研究提供較好的一個(gè)方法學(xué)技術(shù)。
三、光遺傳學(xué)技術(shù)在動(dòng)物行為學(xué)中的應(yīng)用研究
光遺傳學(xué)技術(shù)在動(dòng)物行為學(xué)應(yīng)用中有良好前景，尤其適用于探索特定類型神經(jīng)元活動(dòng)范式與動(dòng)物行為改變之間因果關(guān)系的研究。光遺傳學(xué)技術(shù)在動(dòng)物交際行為、恐懼記憶行為、獎(jiǎng)賞記憶行為、焦慮樣行為等行為學(xué)的神經(jīng)回路進(jìn)行深入研究，不僅可以記錄活體動(dòng)物的腦整體活動(dòng)，也可記錄擬研究神經(jīng)回路活動(dòng)的細(xì)胞、分子的活動(dòng)表現(xiàn)，是研究動(dòng)物行為學(xué)的神經(jīng)回路的一個(gè)重要事件，推動(dòng)了神經(jīng)回路研究的進(jìn)步。
然而，涉及神經(jīng)回路和腦功能的研究，不能直接在人體上進(jìn)行，動(dòng)物模型成了重要選擇。能否在動(dòng)物身上建立精神性疾病模型存在爭(zhēng)議。例如，精神性疾病的一些診斷特點(diǎn)，如悲傷，內(nèi)疚，妄想和思維混亂，這些癥狀在動(dòng)物模型中難以確定［12］。目前，已成功建立了能概括精神性疾病重要特征，如恐懼記憶、焦慮癥、抑郁癥等動(dòng)物模型。同時(shí)，應(yīng)用光遺傳學(xué)闡明嚙齒動(dòng)物模型中有關(guān)精神疾病許多復(fù)雜行為的相關(guān)神經(jīng)通路。
1焦慮-社交障礙癥候群動(dòng)物行為學(xué)
根據(jù)臨床資料，焦慮癥和社交功能障礙之間有著顯著的聯(lián)系，這種聯(lián)系可能為理解焦慮癥和社交障礙的共同神經(jīng)通路提供線索。抗焦慮藥物可減少當(dāng)動(dòng)物被放置在易焦慮環(huán)境中的社交受損［13］。不同的自閉癥小鼠模型均表現(xiàn)出明顯的社交功能障礙以及增強(qiáng)的焦慮樣行為［14］。這些研究均表明，焦慮癥和社交功能是緊密聯(lián)系的，并且可能存在一個(gè)共同的病理神經(jīng)機(jī)制。
2焦慮樣行為的動(dòng)物行為學(xué)
焦慮鼠模型的光遺傳學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)特定的杏仁核突觸，可快速可逆地調(diào)制焦慮水平。Tye等［15］研究發(fā)現(xiàn)，利用ChR2成功表達(dá)后，進(jìn)行光照射，可以通過(guò)激活基底外側(cè)杏仁核(BasolateralAmygdala，BLA)到中央杏仁核(CentralAmygdala，CeA)的突觸投射，小鼠的開臂時(shí)間增多，表明產(chǎn)生去焦慮樣行為；利用eNpHR3.0成功表達(dá)后，進(jìn)行光照射，可以通過(guò)抑制突觸連接，小鼠在高架十字迷宮的開臂時(shí)間減少，小鼠表現(xiàn)為焦慮樣行為。
為了研究基底外側(cè)杏仁核-腹側(cè)海馬(vHPC)通路，研究者［16］將感光視蛋白表達(dá)于BLA谷氨酸能神經(jīng)元且視覺(jué)纖維被定位在BLA軸突終止的vHPC內(nèi)，光刺激BLA中止于vHPC的膽堿能神經(jīng)元誘發(fā)的焦慮樣效應(yīng)被vHPC的谷氨酸能神經(jīng)元抑制，證實(shí)興奮BLA-vHPC神經(jīng)通路可增加焦慮，抑制BLA-vHPC的軸突將減少焦慮鼠模型中焦慮相關(guān)行為。此研究確定了BLA-vHPC為一個(gè)雙向控制焦慮相關(guān)行為的神經(jīng)通路。
3基底外側(cè)杏仁核-腹側(cè)海馬(BLA-vHPC)神經(jīng)回路的闡明
疾病動(dòng)物模型如恐懼記憶的神經(jīng)回路研究，得益于鼠聽覺(jué)恐懼反射的杏仁核模型，即杏仁核恐懼條件反射。Petreanu等［17］利用光遺傳學(xué)技術(shù)將ChR2表達(dá)在大鼠丘腦核和運(yùn)動(dòng)皮層興奮性神經(jīng)元上，通過(guò)光刺激，在活體腦進(jìn)行電位記錄，實(shí)現(xiàn)了興奮性神經(jīng)元與體感覺(jué)皮層錐體細(xì)胞間突觸的精確定位。這一方法，為研究完整神經(jīng)回路中發(fā)生突觸聯(lián)系的神經(jīng)元提供了較為廣闊的途徑。
關(guān)鍵詞：導(dǎo)課 實(shí)驗(yàn) 思維 成功 興趣
我校是一個(gè)小縣城的三類學(xué)校，學(xué)生基礎(chǔ)普遍不好，在遭受中考的挫敗后，學(xué)習(xí)動(dòng)力嚴(yán)重不足，如何將他們重新拉回課堂，恢復(fù)他們的自信，重新投入到緊張的高中學(xué)習(xí)生活當(dāng)中，這是最為緊迫的問(wèn)題。
成功教育理論讓我受到啟發(fā)，高中物理課堂教學(xué)中學(xué)生在課堂上的“冷場(chǎng)”、“局外人”現(xiàn)象正是由于缺少成功的體驗(yàn)，缺少參與的熱情。因此高中物理課堂要尋找學(xué)生感興趣的話題，站在學(xué)生的生活經(jīng)驗(yàn)上，激發(fā)他們的興趣，讓每一個(gè)學(xué)生體驗(yàn)到暢所欲言帶來(lái)的樂(lè)趣與成就感。
一、運(yùn)用新穎的導(dǎo)課方法，引發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣
運(yùn)用小魔術(shù)、小實(shí)驗(yàn)、講故事、說(shuō)新聞、看圖片、幻燈片及多媒體等手段，引導(dǎo)學(xué)生從情景中進(jìn)入角色。
[案例1]大氣壓強(qiáng)――小魔術(shù)引入
一進(jìn)入課堂老師手拿著一個(gè)碗問(wèn)學(xué)生，誰(shuí)能夠用手掌把碗吸引住而不往下掉呢？學(xué)生都搖頭表示不能，此時(shí)，老師右手拿碗（事先把碗底弄濕），往左手手掌心上用力壓一下，排除碗底里面的空氣，慢慢地轉(zhuǎn)動(dòng)左手手掌，使手掌心朝下，然后松開右手，看到了碗被左手掌心吸住了而不往下掉。學(xué)生驚嘆之余，再引出大氣壓強(qiáng)，學(xué)生興趣倍增。
[案例2]慣性――小實(shí)驗(yàn)引入
在引入慣性新課時(shí)，老師可用這樣一個(gè)實(shí)驗(yàn)來(lái)引入。在一個(gè)盛有半杯水的燒杯口上放一塊硬塑料片，塑料片上放一個(gè)雞蛋，用不銹鋼尺（相當(dāng)于彈片）與塑料片垂直后拉開，問(wèn)學(xué)生，“放手后，雞蛋會(huì)怎樣？”此時(shí)學(xué)生的注意力都集中到了雞蛋上，有的說(shuō)雞蛋會(huì)隨塑料片飛出來(lái)，有的說(shuō)不會(huì)。這時(shí)，老師把變彎的鋼尺一松手，“啪”的一聲，塑料片飛出去了，只見雞蛋穩(wěn)穩(wěn)當(dāng)當(dāng)?shù)芈湓谒?，學(xué)生緊張而專注地目睹了這一切，此時(shí)，再問(wèn)“為什么呢？”學(xué)生注意力高度集中，興趣盎然。
[案例3]磁現(xiàn)象――故事引入
在講授磁現(xiàn)象這一節(jié)時(shí)，可以用講故事的方式引入。秦始皇在建阿房宮時(shí)，為了防止刺客進(jìn)入宮內(nèi)，在進(jìn)宮大門的兩邊放置兩塊大磁石。此時(shí)問(wèn)：你們知道為什么嗎？課堂上頓時(shí)活躍起來(lái)。
[案例4]樂(lè)音三特征――視頻引入
在引入樂(lè)音三特征這一節(jié)時(shí)，首先讓學(xué)生觀看《交響樂(lè)音樂(lè)會(huì)》錄象片段，讓學(xué)生感受到樂(lè)音的高低起伏（音調(diào)），輕重大?。懚龋筒煌瑯?lè)器聲音的差別（音色）。這樣的視頻引入，把平淡的文字表達(dá)演化為生動(dòng)直觀的形象，把抽象的知識(shí)演化為具體的可以感受到的東西，能迅速抓住學(xué)生的眼球，使學(xué)生產(chǎn)生濃厚的興趣。
導(dǎo)入新課時(shí)提出一些日常生活中常見的物理現(xiàn)象，引起學(xué)生的好奇心，從而引發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。例如：講壓強(qiáng)時(shí)問(wèn)：為什么我們坐在沙發(fā)上比坐在子上舒服一些？磨刀不誤砍柴工的物理道理是什么？在講摩擦起電時(shí)問(wèn)：油罐車為什么拖一條尾巴――鐵鏈？冬季晚間脫毛衣時(shí)往往看到火星閃爍？在講影響浮力大小的因素時(shí)問(wèn)：為什么生餃子或元宵沉在水底，煮熟后浮在水面之上？
二、新、奇、懸、趣、迷的實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生見之生趣
眾所周知，物理學(xué)是一門以實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)的科學(xué)，對(duì)于中學(xué)生來(lái)說(shuō)，新、奇、懸、趣、迷的實(shí)驗(yàn)，會(huì)使他們感到新鮮和好奇，可以給他們帶來(lái)饒有興趣的樂(lè)趣，在此基礎(chǔ)上，才能使他們有效地掌握物理基礎(chǔ)知識(shí)，使之逐步取得探索物理知識(shí)的主動(dòng)權(quán)，掌握學(xué)習(xí)方法，培養(yǎng)自學(xué)能力。
[案例1]學(xué)習(xí)“功”這一章時(shí)，對(duì)功、功率、機(jī)械效率三個(gè)概念容易混淆，為了解決這一難題，可以設(shè)計(jì)一堂比賽形式的實(shí)驗(yàn)課，比比誰(shuí)做的功最多，誰(shuí)的功率最大，誰(shuí)的機(jī)械效率最高。每個(gè)同學(xué)都抱五塊磚以最快的速度從一樓跑上四樓，設(shè)計(jì)方案，測(cè)出自己做的功，功率、機(jī)械效率。然后集體討論評(píng)選出四個(gè)“全班之最”。上樓最快的，做功最多的，功率最大的，機(jī)械效率最高的，四項(xiàng)冠軍分別由四位同學(xué)獲取。這一結(jié)果把學(xué)生的思維集中到了同一個(gè)焦點(diǎn)上，為什么做功最多的，功率不是最大？機(jī)械效率也不是最高？為什么上樓最快的，做功卻不是最多？通過(guò)這樣生動(dòng)有趣的實(shí)驗(yàn)課，把本來(lái)混淆不清的概念變得簡(jiǎn)單易懂，把理論知識(shí)轉(zhuǎn)變成了親眼所見的事實(shí)，使學(xué)生在歡快的“游戲”中，學(xué)到實(shí)在的知識(shí)。
[案例2] 例如講“熱傳遞”時(shí)，演示“開水煮活魚而魚不死”，吸引學(xué)生的注意力。在“慣性、慣性定律”教學(xué)中，裝滿水的杯子，當(dāng)水杯突然向左運(yùn)動(dòng)，杯內(nèi)的水會(huì)從杯口溢出來(lái)嗎？杯內(nèi)的水是向什么方向溢出的？為什么會(huì)發(fā)生這種現(xiàn)象？教師在講臺(tái)前認(rèn)真演示，請(qǐng)同學(xué)回答現(xiàn)象，這樣引入新課，也能激發(fā)學(xué)生學(xué)新知識(shí)的欲望。除演示實(shí)驗(yàn)作為引子外，還可以講述物理學(xué)史的內(nèi)容，來(lái)開闊學(xué)生眼界，了解物理學(xué)家及其思想工作、方法，來(lái)增強(qiáng)物理教學(xué)的魅力；而講述一些有趣味的小故事，也能吸引學(xué)生的注意力，引起學(xué)生興趣。
[案例3]給學(xué)生適時(shí)講授有趣味的故事是滿足學(xué)生學(xué)習(xí)興趣的一種補(bǔ)償方式。例如在講到玻意耳――-馬略特定律的時(shí)候，介紹定律的來(lái)歷以及不同國(guó)家對(duì)定律的不同稱呼可以吸引學(xué)生的注意力，為進(jìn)一步學(xué)習(xí)創(chuàng)造良好的氛圍。當(dāng)講到歷史上曾有一位學(xué)者叫赫曼，為了驗(yàn)證天電（閃電）與它電是否是同種電，竟被雷電擊死在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上時(shí)，課堂一片寂靜。當(dāng)講到秦始皇在建阿房宮時(shí)用磁石來(lái)防刺客時(shí)，課堂上又是一片活躍氣氛。
[案例4]舉例寓趣，置疑設(shè)趣，習(xí)題融趣，在課堂教學(xué)中，教師可以適時(shí)地穿插一些日常生活中富有趣味性的例子，來(lái)說(shuō)明物理原理。例如講授“聲音可否在固體中傳播”時(shí)，舉例：“伏地聽聲”的故事，人可以伏在荒野的地上聽到遠(yuǎn)處的馬蹄聲。在進(jìn)行液化教學(xué)時(shí)，舉例：夏天從冰箱里拿出來(lái)的雞蛋會(huì)“出汗”，用此來(lái)說(shuō)明液化原理，就可以活躍課堂氣氛，激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)的興趣。在課堂教學(xué)中，“設(shè)疑”也是教學(xué)中一個(gè)重要手段，它可以開發(fā)學(xué)生思路，激發(fā)學(xué)生探索知識(shí)的興趣，使其主動(dòng)去學(xué)。正因?yàn)槿绱?，教師不僅善于釋疑，以激發(fā)學(xué)生的好奇心，引發(fā)學(xué)生的注意力，喚起學(xué)生學(xué)習(xí)物理知識(shí)的興趣。例如：雞蛋握在手心中不容易捏破，而放在桌上，只要一個(gè)手指往下一按，就壓破？為什么熱粥要一面攪拌，一面吹氣，才使稀飯涼得快？象這類設(shè)差別，既貼近生活，又能激發(fā)學(xué)生的好奇心，引起興趣。
三、努力提供“成功的機(jī)會(huì)”，增強(qiáng)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣
不論是教師的講授，還是實(shí)驗(yàn)，都應(yīng)努力創(chuàng)造一種有利于學(xué)生獨(dú)立思考的情景，始終將學(xué)生置于探索者、發(fā)現(xiàn)者的位置，在條件許可的情況下應(yīng)盡可能將物理課移到實(shí)驗(yàn)室去上，演示實(shí)驗(yàn)盡可能讓學(xué)生參與，讓學(xué)生切身體會(huì)到成功的樂(lè)趣。
關(guān)鍵詞：初中物理 探究式教學(xué) 主動(dòng)學(xué)習(xí)
中圖分類號(hào)： G633.55 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： C 文章編號(hào)：1672-1578（2013）02-0167-01
物理探究式教學(xué)的課程標(biāo)準(zhǔn)要求，探究性教學(xué)是以教師指導(dǎo)為主，培養(yǎng)學(xué)生探究學(xué)習(xí)物理的興趣，達(dá)到促進(jìn)學(xué)生主動(dòng)學(xué)習(xí)物理知識(shí)，思考物理問(wèn)題，教師在實(shí)施探究式物理教學(xué)實(shí)踐中，要充分發(fā)揮學(xué)生的主體地位，激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)物理的積極性和主動(dòng)性，鼓勵(lì)學(xué)生大膽發(fā)表自己的意見和見解。
1 探究學(xué)習(xí)中注重培養(yǎng)學(xué)生的主動(dòng)學(xué)習(xí)的意識(shí)
物理探究性學(xué)習(xí)的核心是讓學(xué)生能主動(dòng)的學(xué)習(xí)物理知識(shí)，探究教學(xué)中，教師要充分發(fā)揮學(xué)生的主體學(xué)習(xí)物理知識(shí)的積極性和主動(dòng)性。物理探究式教學(xué)所提倡的是在課堂上教師的地位與學(xué)生的地位平等，但教師的重要引導(dǎo)作用并沒(méi)有否定，在教學(xué)實(shí)踐中是不斷被強(qiáng)化。這種探究學(xué)習(xí)方式不僅要求教師在探究中要深入到學(xué)生的心靈中去，成為真正的良師益友，而且，教師還要與學(xué)生進(jìn)行語(yǔ)言、行動(dòng)的交流，互動(dòng)。在物理探究式教學(xué)過(guò)程中，何謂確立學(xué)生在探究學(xué)習(xí)中的主體地位，新課程改革標(biāo)準(zhǔn)解釋既：在進(jìn)行物理探究教學(xué)中要面對(duì)全體學(xué)生，教師密切注意學(xué)生的物理探究學(xué)習(xí)中的學(xué)習(xí)差異，然后教師精心設(shè)計(jì)探究教學(xué)情境，要有目的地設(shè)置疑難問(wèn)題，以激發(fā)學(xué)生探究學(xué)習(xí)的興趣，以學(xué)生的疑和學(xué)生的問(wèn)的有機(jī)結(jié)合為基礎(chǔ)，而最終達(dá)到學(xué)習(xí)和快樂(lè)不可分的探究學(xué)習(xí)境界，在教學(xué)中，教師可以先設(shè)定一個(gè)全班同學(xué)都能完成的學(xué)習(xí)目標(biāo)，稱總目標(biāo)，在此基礎(chǔ)上，再讓學(xué)生確立自己個(gè)人的探究學(xué)習(xí)目標(biāo)，依據(jù)的是學(xué)生個(gè)體的的學(xué)習(xí)情況，物理探究學(xué)習(xí)興趣等因素。那么，個(gè)體的和整體的探究學(xué)習(xí)目標(biāo)，就會(huì)成為學(xué)生探究學(xué)習(xí)的新動(dòng)力和進(jìn)行創(chuàng)新思維的導(dǎo)火線，改變學(xué)生的被動(dòng)學(xué)習(xí)方式，積極主動(dòng)的進(jìn)行探究學(xué)習(xí)，學(xué)生的主動(dòng)學(xué)習(xí)的意識(shí)得到培養(yǎng)。
2 在物理探究教學(xué)中激發(fā)學(xué)生的創(chuàng)新思維
學(xué)生在學(xué)習(xí)的過(guò)程中的創(chuàng)新意識(shí)與能力的培養(yǎng)是未來(lái)為社會(huì)開創(chuàng)新知識(shí)的基礎(chǔ)和關(guān)鍵時(shí)期。如何培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新意識(shí)與能力，是廣大教師在教學(xué)中必須探討的問(wèn)題，也是責(zé)任，這就要求，首先在物理教學(xué)中要關(guān)注學(xué)生的問(wèn)題意識(shí)的培養(yǎng)。著名哲學(xué)家波普爾曾說(shuō)：“科學(xué)和知識(shí)的增長(zhǎng)總是始于問(wèn)題和終結(jié)于問(wèn)題，甚至是不斷增加深度的問(wèn)題，以及不斷產(chǎn)生那些能夠啟示出新問(wèn)題的問(wèn)題”。因此，學(xué)生的創(chuàng)新意識(shí)與能力的培養(yǎng)的是指在物理學(xué)習(xí)探究中，學(xué)生發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題或提出新的與別人不同的的有關(guān)物理知識(shí)的問(wèn)題，即稱為創(chuàng)新性的探究物理知識(shí)的問(wèn)題，學(xué)生物理探究學(xué)習(xí)是針對(duì)接受學(xué)習(xí)的缺點(diǎn)而創(chuàng)新的學(xué)生的學(xué)習(xí)方式，在物理探究教學(xué)中，物理教師不能只是向?qū)W生灌輸書面知識(shí)，而要成為學(xué)生學(xué)習(xí)和獲得新知識(shí)的領(lǐng)航人，點(diǎn)撥人。讓學(xué)生真正成為創(chuàng)新思維的主體。在物理探究教學(xué)中，教師要積極鼓勵(lì)學(xué)生參與物理知識(shí)的思維創(chuàng)新的學(xué)習(xí)的全過(guò)程，讓學(xué)生對(duì)所學(xué)物理新知識(shí)“知其然，知其所以然”。在物理探究課堂教學(xué)中，物理教師要不斷鼓勵(lì)學(xué)生大膽嘗試，大力表?yè)P(yáng)有獨(dú)特創(chuàng)意的，別出心裁的發(fā)現(xiàn)的學(xué)生，當(dāng)然，也要鼓勵(lì)學(xué)習(xí)物理新知識(shí)有困難的學(xué)生，激勵(lì)他們不斷探索，探究學(xué)習(xí)要面向全體，物理探究學(xué)習(xí)實(shí)踐表明：學(xué)生的探究的能力，堅(jiān)韌地學(xué)習(xí)態(tài)度以及創(chuàng)新精神，都是來(lái)源于學(xué)生自己的實(shí)踐，在學(xué)習(xí)實(shí)踐中逐步養(yǎng)成的，只有在教學(xué)中發(fā)揮學(xué)生的主動(dòng)性和創(chuàng)造性，讓學(xué)生積極地參與解疑釋惑的過(guò)程，才能實(shí)現(xiàn)激發(fā)學(xué)生創(chuàng)新思維良好培養(yǎng)。
3 物理探究性學(xué)習(xí)中教師要積極引導(dǎo)學(xué)生
物理探究教學(xué)課堂的探究活動(dòng)的目的，是使學(xué)生自身積極的，主動(dòng)地學(xué)習(xí)探究物理知識(shí)，了解物理現(xiàn)象，認(rèn)識(shí)物理規(guī)律，最終達(dá)到解決物理問(wèn)題的學(xué)習(xí)活動(dòng)，但在物理探究學(xué)習(xí)活動(dòng)中，學(xué)生不能孤立的去學(xué)習(xí)，學(xué)生離不開教師課堂上的及時(shí)指導(dǎo)，教師在此探究學(xué)習(xí)方法中的指導(dǎo)作用是非常重要的，物理教師在探究教學(xué)中，一定要精心設(shè)計(jì)問(wèn)題情境，只有為學(xué)生營(yíng)造發(fā)現(xiàn)問(wèn)題的探究學(xué)習(xí)情境，積極引導(dǎo)學(xué)生在問(wèn)題情境中學(xué)習(xí)新的物理知識(shí)，新課程物理教學(xué)目標(biāo)要求：在物理教學(xué)中使用探究式教學(xué)的目的，是讓學(xué)生在探究學(xué)習(xí)活動(dòng)的過(guò)程中，在教師的引導(dǎo)下，進(jìn)行探究學(xué)習(xí)活動(dòng)，然后通過(guò)學(xué)生親身體驗(yàn)，感受。教師在物理探究活動(dòng)中，還要及時(shí)了解學(xué)生的學(xué)習(xí)情況，隨時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，解決問(wèn)題，有針對(duì)地對(duì)學(xué)生進(jìn)行指導(dǎo)，點(diǎn)撥，從而培養(yǎng)學(xué)生的物理學(xué)習(xí)探究的能力。
4 探究教學(xué)中要確定學(xué)生的主體地位，同時(shí)對(duì)學(xué)生提出的問(wèn)題給予科學(xué)的引導(dǎo)
教師在物理探究教學(xué)中，應(yīng)精心設(shè)置教學(xué)的問(wèn)題情景，問(wèn)題情境的設(shè)計(jì)科學(xué)會(huì)獲得兩方面的價(jià)值：一方面是能使物理探究教學(xué)中，學(xué)生所提出的問(wèn)題有了存在的基礎(chǔ)，另一方面也有助于培養(yǎng)學(xué)生在物理探究性學(xué)習(xí)中發(fā)現(xiàn)問(wèn)題和提出問(wèn)題的能力和勇于置疑的科學(xué)探究精神。如在物理探究課堂教學(xué)中，教師可以精心設(shè)計(jì)一些探究教學(xué)的情境，讓學(xué)生在教師設(shè)置的探究教學(xué)情境中，能夠積極主動(dòng)的去發(fā)現(xiàn)與物理探究教學(xué)內(nèi)容有關(guān)的新問(wèn)題，然后再向老師書面或口頭提出發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題，當(dāng)然，學(xué)生所提的問(wèn)題往往是膚淺的，通常只是在觀察到的表面現(xiàn)象后面加一個(gè)問(wèn)號(hào)而已。
例如：在初中物理教本的“物質(zhì)的比熱容”一節(jié)中，教師設(shè)計(jì)的物理探究學(xué)習(xí)情境為：“初夏小東和小榮到海邊游玩，中午，光腳走在海邊的沙灘上，覺(jué)得沙子很燙；當(dāng)他們跳到海里時(shí)，覺(jué)得海水很涼，傍晚時(shí)他們又去海邊，卻發(fā)現(xiàn)沙子變涼了而海水卻很暖和?！痹诖私虒W(xué)環(huán)節(jié)中，大都學(xué)生會(huì)提出針對(duì)這情景的問(wèn)題：“為什么中午沙子燙海水涼？而到了傍晚卻是沙子涼而海水暖和？”?？梢?，學(xué)生的問(wèn)題只是停留在現(xiàn)象表面，在觀察到的現(xiàn)象后直接給個(gè)問(wèn)號(hào)。學(xué)生提的問(wèn)題通常不會(huì)去深究現(xiàn)象的內(nèi)在，不去考慮現(xiàn)象產(chǎn)生的條件等因素，也不能運(yùn)用準(zhǔn)確的物理概念，物理術(shù)語(yǔ)把問(wèn)題表達(dá)準(zhǔn)確，顯然更談不上讓學(xué)生對(duì)發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題進(jìn)行研究了。在物理探究教學(xué)中，教師要針對(duì)這種情況，要及時(shí)的。適時(shí)的，指導(dǎo)學(xué)生，引導(dǎo)學(xué)生把生活知識(shí)與物理知識(shí)進(jìn)行融合，讓學(xué)生真正的從生活中探索出物理知識(shí)。從而實(shí)現(xiàn)學(xué)生探究性學(xué)習(xí)的目的。
參考文獻(xiàn)：
1.利用行動(dòng)研究法培養(yǎng)發(fā)散性思維的理論依據(jù)
1.1行動(dòng)研究法是教師教育科研主要方法
行動(dòng)研究法是一種不必人為控制和改變自然教學(xué)情況，既可定量分析又可定性分析，既能解決實(shí)際問(wèn)題又能形成理論的教育科研操作的模式。行動(dòng)研究法一般采用四個(gè)循環(huán)階段來(lái)實(shí)施研究，即計(jì)劃――行動(dòng)――考查――反思，由于可操作性強(qiáng)、效果好，因此成為教師教育科研主要方法。
1.2發(fā)散性思維的特點(diǎn)決定了行動(dòng)研究的必要性
每一個(gè)教學(xué)的內(nèi)容都有一個(gè)關(guān)鍵的信息（問(wèn)題），教師可以從一個(gè)問(wèn)題出發(fā)，引導(dǎo)學(xué)生突破原有的知識(shí)圈，充分發(fā)揮他們的想象力，激勵(lì)他們經(jīng)不同途徑，以不同角度去探索，重組眼前信息和記憶中的信息，產(chǎn)生新的信息，而最終既能使問(wèn)題得到圓滿解決，又能培養(yǎng)學(xué)生的發(fā)散性思維。
但是在學(xué)生利用發(fā)散性思維解決問(wèn)題時(shí)，很容易與開始的問(wèn)題偏離，如何及時(shí)的引導(dǎo)學(xué)生回歸主線，這個(gè)只有在行動(dòng)中才能發(fā)現(xiàn)問(wèn)題。而且在初次教學(xué)設(shè)計(jì)中教師預(yù)設(shè)的教學(xué)流程能否有效地培養(yǎng)學(xué)生發(fā)散性思維，也必須通過(guò)行動(dòng)研究才能得出結(jié)論，因此行動(dòng)研究十分必要。
1.3行動(dòng)研究法更有利于培養(yǎng)學(xué)生的發(fā)散性思維
教師是課堂的引導(dǎo)者，一般會(huì)通過(guò)一系列的教學(xué)環(huán)節(jié)來(lái)培養(yǎng)學(xué)生的發(fā)散性思維。通過(guò)行動(dòng)積累經(jīng)驗(yàn)，在行動(dòng)中構(gòu)建出發(fā)散性思維的培養(yǎng)方法。然后在進(jìn)行教學(xué)反思，研究多種課例課型，在研究中完善和落實(shí)發(fā)散性思維的培養(yǎng)方法。這將更有效的提高教學(xué)效率，更有利于培養(yǎng)學(xué)生的發(fā)散性思維。
2.行動(dòng)研究法培養(yǎng)生物發(fā)散性思維的教學(xué)實(shí)例
下面筆者以《生命中的能量》專題《第1講：細(xì)胞代謝》為例，采用“計(jì)劃――行動(dòng)――考查――反思” 四個(gè)循環(huán)階段來(lái)實(shí)施研究。
2.1第一次教學(xué)設(shè)計(jì)現(xiàn)狀呈現(xiàn)
2.1.1計(jì)劃（如圖一）
圖一
2.1.2行動(dòng)
針對(duì)第一次的教學(xué)設(shè)計(jì)，對(duì)第一個(gè)教學(xué)班進(jìn)行教學(xué)，發(fā)現(xiàn)以下環(huán)節(jié)存在問(wèn)題：
a.“回歸課本，尋找本節(jié)的知識(shí)要素”環(huán)節(jié)
學(xué)生只是機(jī)械的學(xué)習(xí)，無(wú)法調(diào)動(dòng)學(xué)生的思維，無(wú)法達(dá)到教學(xué)目標(biāo)。
b.“光合作用與呼吸作用相關(guān)知識(shí)?？记腥朦c(diǎn)定位”環(huán)節(jié)
相關(guān)知識(shí)?？记腥朦c(diǎn)比較多，發(fā)現(xiàn)學(xué)生存在的問(wèn)題又難以深入解釋，像蜻蜓點(diǎn)水，講不透又講的不到位，效果不好，學(xué)生只停留于知識(shí)的表面，無(wú)法形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。
c.“正誤判斷、回歸基礎(chǔ)”環(huán)節(jié)
很多學(xué)生在基礎(chǔ)方面都不過(guò)關(guān)，對(duì)于課本的概念、課后練習(xí)的內(nèi)容，沒(méi)有花時(shí)間去學(xué)習(xí)，對(duì)于老師布置的看書作業(yè)，不知道如何看，如何回歸課本，暴露出很多問(wèn)題。
2.1.3考查
本節(jié)課的教學(xué)對(duì)象是高三2班（普通班）的學(xué)生（一模均分略低于廣州市平均分），上課時(shí)主要是使用導(dǎo)學(xué)案引導(dǎo)學(xué)生學(xué)習(xí)，教學(xué)中發(fā)現(xiàn)了很多超出預(yù)期的問(wèn)題，進(jìn)而暴露出教學(xué)設(shè)計(jì)存在的問(wèn)題，具體表現(xiàn)如下：
1）教學(xué)目標(biāo)達(dá)成度低，教學(xué)效率不高。
2）學(xué)生不會(huì)回歸課本，看書沒(méi)有章法，知識(shí)缺漏較多，比如ATP是能量還是物質(zhì)分不清。
3）學(xué)生沒(méi)有體驗(yàn)如何構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)，發(fā)散性思維沒(méi)有得到訓(xùn)練，因此學(xué)習(xí)效果不好。
2.1.4反思
本節(jié)課的教學(xué)設(shè)計(jì)對(duì)學(xué)生的具體情況估計(jì)不足，教學(xué)目標(biāo)達(dá)成度低，教學(xué)效率不高。如果進(jìn)行修改，應(yīng)凸顯學(xué)案的引導(dǎo)作用，教會(huì)學(xué)生學(xué)習(xí)。要把構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)過(guò)程和教會(huì)學(xué)生如何科學(xué)的回歸課本作為教學(xué)重點(diǎn)來(lái)抓，并進(jìn)行回歸課本演示。
2.2第二次教學(xué)設(shè)計(jì)現(xiàn)狀呈現(xiàn)（海珠區(qū)高三生物二輪復(fù)習(xí)公開課現(xiàn)場(chǎng)）
2.2.1計(jì)劃
a.依據(jù)第一次的教學(xué)設(shè)計(jì)做出的反思，調(diào)整教學(xué)目標(biāo)如下（圖二）：
圖二
b.增加“專題的切入點(diǎn)和主線”這一環(huán)節(jié)
以能量為切入點(diǎn)，把與能量有關(guān)的知識(shí)點(diǎn)羅列出來(lái)，按照一定的邏輯關(guān)系，形成專題學(xué)習(xí)的主線，使學(xué)生更加明確本專題要學(xué)哪些內(nèi)容，本節(jié)課位于專題的哪個(gè)位置。
c.把知識(shí)梳理作為教學(xué)重點(diǎn)，讓學(xué)會(huì)用發(fā)散性思維來(lái)構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)
d.回歸課本、方法歸納、變式訓(xùn)練，反饋提升，這幾個(gè)環(huán)節(jié)是發(fā)散性思維的另一種體現(xiàn)，也是在學(xué)生形成理性認(rèn)識(shí)的基礎(chǔ)上的第二次實(shí)踐活動(dòng)，是課堂教學(xué)的一次重要反饋。
2.2.2行動(dòng)
a.梳理光合作用和呼吸作用的能量和物質(zhì)關(guān)系，構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)
教學(xué)原狀：
這是本節(jié)重點(diǎn)教學(xué)目標(biāo)之一，主要是鼓勵(lì)思維的碰撞，鼓勵(lì)任何形式的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)，老師只要指出科學(xué)性錯(cuò)誤即可。
學(xué)生反饋：
學(xué)生存在嚴(yán)重的知識(shí)缺漏，比如對(duì)于光合作用和呼吸作用的過(guò)程不是很清楚。學(xué)生對(duì)于能量的相互轉(zhuǎn)化關(guān)系混淆不清。認(rèn)為光反應(yīng)產(chǎn)生的ATP可以用于生命活動(dòng)調(diào)節(jié)，認(rèn)為能量就是ATP，認(rèn)為呼吸作用產(chǎn)生的能量包含了電能、機(jī)械能等。學(xué)生在畫圖的過(guò)程中提出很多的疑問(wèn)，并且與預(yù)期的結(jié)果相差較大，但是整個(gè)課堂因此也充滿了活力，學(xué)生課后知識(shí)的掌握情況比較理想。
b.回歸課本、方法歸納
教學(xué)原狀：精選例題（2012山東卷2），引導(dǎo)學(xué)生解題，歸納出直角坐標(biāo)題的解題方法。引導(dǎo)學(xué)生回歸課本，找到課本原題對(duì)比，讓學(xué)生重視課后練習(xí)題，不要一味的追求難題怪題。讓學(xué)生認(rèn)同“回歸課本、方法歸納”也是發(fā)散性思維的一種運(yùn)用方式。
學(xué)生反饋：認(rèn)同回歸課本的重要性，更加明確回歸課本要落到實(shí)處，看書不要走馬觀花，能夠歸納出曲線坐標(biāo)圖的解題方法。
c.變式訓(xùn)練，反饋提升
教學(xué)原狀：通過(guò)變式1，鞏固學(xué)生對(duì)“凈光合速率與總光合速率”這一知識(shí)點(diǎn)，提高學(xué)生的作圖能力。通過(guò) 變式2，引導(dǎo)學(xué)生對(duì)圖表進(jìn)行分析、緊扣“光合作用和細(xì)胞呼吸過(guò)程中物質(zhì)和能量的關(guān)系”這一教學(xué)重點(diǎn)，反饋提升。教會(huì)學(xué)生使用發(fā)散性思維解決問(wèn)題，從而做到一題多解，多題一解。
學(xué)生反饋：認(rèn)同以能量作為切入點(diǎn)，可以將高考的重要考點(diǎn)串起來(lái)，光合作用與細(xì)胞呼吸之一考點(diǎn)伴隨著圖表考查的可能性很大，掌握這一方面的技能是必須的。
2.2.3考查
本節(jié)課的教學(xué)對(duì)象是高三4班（普通班）的學(xué)生（一模均分略低于廣州市平均分），由于有布置課前預(yù)習(xí)，專題主線很清晰，在學(xué)生利用發(fā)散性思維構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)圖的時(shí)候，能夠做到及時(shí)引導(dǎo)學(xué)生回歸課本，填補(bǔ)知識(shí)缺漏。因此本節(jié)課目標(biāo)達(dá)成度較高，聽課的同行評(píng)價(jià)：這是一節(jié)高效的優(yōu)秀二輪復(fù)習(xí)課，適合推廣。
3.研究方法的推廣和總結(jié)反思
3.1基于學(xué)情，在行動(dòng)中優(yōu)化教學(xué)設(shè)計(jì)
摸清學(xué)生的知識(shí)現(xiàn)狀，找準(zhǔn)切入點(diǎn)，進(jìn)行適合本校學(xué)生的專題訓(xùn)練，不一定按照教輔用書的順序安排教學(xué)，要在行動(dòng)中不斷的積累經(jīng)驗(yàn)，根據(jù)學(xué)生的反饋，合理優(yōu)化教學(xué)設(shè)計(jì)。
3.2在行動(dòng)中培養(yǎng)學(xué)生的發(fā)散性思維，提高教學(xué)效率
在平時(shí)的教學(xué)中，教師要引導(dǎo)學(xué)生緊密圍繞問(wèn)題進(jìn)行進(jìn)行知識(shí)梳理和歸納，及時(shí)發(fā)現(xiàn)學(xué)生的知識(shí)缺漏和思維現(xiàn)狀，鼓勵(lì)學(xué)生不斷完善知識(shí)框架；可以進(jìn)行一題多解、多題一解、同考點(diǎn)不同形式等變式訓(xùn)練，讓學(xué)生體驗(yàn)使用發(fā)散性思維解決問(wèn)題的好處，在行動(dòng)中培養(yǎng)發(fā)散性思維，提高教學(xué)效率。
3.3研究方法的推廣和再探究
關(guān)鍵詞：高職；移動(dòng)微型；電子商務(wù)；學(xué)習(xí)資源；開發(fā)
基金項(xiàng)目：蘇州市教育科學(xué)規(guī)劃課題（編號(hào)：16000z029）
我國(guó)的信息技術(shù)發(fā)展得越來(lái)越快，隨著性能優(yōu)越的移動(dòng)網(wǎng)絡(luò)地逐漸鋪開，為移動(dòng)學(xué)習(xí)的大規(guī)模應(yīng)用提供了很好的條件。截至2016年6月，我國(guó)的網(wǎng)民規(guī)模已達(dá)到了7.10億，互聯(lián)網(wǎng)的普及率穩(wěn)健地增長(zhǎng)，手機(jī)網(wǎng)民規(guī)模已達(dá)6.56億，使用手機(jī)上網(wǎng)的人群有所提升，網(wǎng)民中選擇的上網(wǎng)設(shè)備也進(jìn)一步地向移動(dòng)端集中。隨著移動(dòng)網(wǎng)絡(luò)的不斷完善和智能手機(jī)的不斷普及，移動(dòng)終端設(shè)備的越來(lái)越多樣化，鑒于終端設(shè)備的多種優(yōu)點(diǎn)，如攜帶方便、移動(dòng)性強(qiáng)、可進(jìn)行無(wú)線上網(wǎng)等，因此用戶對(duì)移動(dòng)互聯(lián)網(wǎng)也越來(lái)越依賴，手機(jī)上網(wǎng)的頻率越來(lái)越高。利用移動(dòng)設(shè)備進(jìn)行移動(dòng)學(xué)習(xí)，學(xué)習(xí)者不再受時(shí)間、空間的限制，可以根據(jù)自己的需要安排學(xué)習(xí)的時(shí)間和內(nèi)容。通過(guò)有效利用這些碎片化的時(shí)間，使學(xué)習(xí)安排達(dá)到最優(yōu)化、效果達(dá)到最大化，也更能提升學(xué)習(xí)效果。
《電子商務(wù)實(shí)務(wù)》是蘇州健雄學(xué)院市場(chǎng)營(yíng)銷專業(yè)的一門專業(yè)必修課，是培養(yǎng)學(xué)生進(jìn)行電子商務(wù)活動(dòng)的實(shí)際操作能力的專業(yè)課程，是市場(chǎng)營(yíng)銷專業(yè)的專業(yè)技能課。重點(diǎn)培養(yǎng)在網(wǎng)絡(luò)環(huán)境下企業(yè)進(jìn)行商務(wù)活動(dòng)所應(yīng)具備的硬件、軟件和技術(shù)方面的相關(guān)能力，創(chuàng)新銷售模式。由于電子商務(wù)的學(xué)習(xí)內(nèi)容更新?lián)Q代比較快，很多時(shí)候?qū)W生學(xué)習(xí)到教材的內(nèi)容已經(jīng)過(guò)時(shí)，要想將最新的知識(shí)傳授給學(xué)生，教師必須不斷地嘗試新的教學(xué)方法和手段。
一、移動(dòng)微型學(xué)習(xí)的內(nèi)涵
（一）移動(dòng)學(xué)習(xí)
移動(dòng)學(xué)習(xí)（M-Learning）是基于數(shù)字化學(xué)習(xí)（E-learning），結(jié)合了移動(dòng)計(jì)算機(jī)的有效的學(xué)習(xí)方式。Kukulska等（2008）認(rèn)為移動(dòng)學(xué)習(xí)是指以手持設(shè)備為媒介，可隨時(shí)隨地進(jìn)行的正規(guī)或者非正規(guī)的學(xué)習(xí)。移動(dòng)學(xué)習(xí)系統(tǒng)環(huán)境的建立和完善不僅僅為學(xué)習(xí)者提供了豐富的學(xué)習(xí)資源，還創(chuàng)造了隨時(shí)隨地學(xué)習(xí)（AAL，Anytime Anywhere Learning）的環(huán)境，從而豐富了自主學(xué)習(xí)、個(gè)性化學(xué)習(xí)和終身學(xué)習(xí)的方式和途徑。
（二）微型學(xué)習(xí)
微型媒體所承載的微型學(xué)習(xí)內(nèi)容，是以實(shí)用短小的內(nèi)容組塊來(lái)呈現(xiàn)學(xué)習(xí)內(nèi)容并組織學(xué)習(xí)活動(dòng)，強(qiáng)調(diào)在有限的時(shí)間內(nèi)學(xué)習(xí)相對(duì)短小的、松散連接的、自包含的知識(shí)內(nèi)容或模塊，常以 但不限于移動(dòng)終端作為載體，如便攜式移動(dòng)設(shè)備：手機(jī)、PDA等手持設(shè)備。為此，需要以微型的媒體來(lái)呈現(xiàn)微型的內(nèi)容，以多種移動(dòng)終端來(lái)承載微型課程，并以移動(dòng)通信工具實(shí)現(xiàn)微型學(xué)習(xí)的互動(dòng)通信。于是，就產(chǎn)生了微型學(xué)習(xí)，微型學(xué)習(xí)需要設(shè)計(jì)一種主題突出、短小精悍的微型學(xué)習(xí)資源作為支撐。
（三）移動(dòng)微型學(xué)習(xí)
移動(dòng)微型學(xué)習(xí)是移動(dòng)學(xué)習(xí)與微型學(xué)習(xí)互相結(jié)合的結(jié)果，是運(yùn)用移動(dòng)終端設(shè)備隨時(shí)隨地進(jìn)行的一種微型學(xué)習(xí)，它把學(xué)習(xí)場(chǎng)所擴(kuò)展到了更為廣闊的領(lǐng)域，方便了人們的學(xué)習(xí)，提高了學(xué)習(xí)效率。移動(dòng)微型學(xué)習(xí)不太適合運(yùn)用于內(nèi)容覆蓋全部主題的學(xué)習(xí)情境，但在運(yùn)用結(jié)構(gòu)化的小信息片斷去更新和補(bǔ)充現(xiàn)存知識(shí)時(shí)最為成功。
二、蘇州健雄職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)生移動(dòng)微型學(xué)習(xí)的學(xué)情分析
（一）學(xué)生的特征分析
蘇州健雄職業(yè)技術(shù)學(xué)院的學(xué)生年齡集中在18―22歲，他們思維活躍，易于快速接受新鮮事物，大部分學(xué)生都擁有并每天使用智能手機(jī)，熟練掌握與手機(jī)相關(guān)的操作技能，學(xué)生從原來(lái)高中學(xué)校進(jìn)入高職院校，學(xué)習(xí)環(huán)境和學(xué)習(xí)方式發(fā)生了很大的變化。由傳統(tǒng)學(xué)習(xí)的被動(dòng)性轉(zhuǎn)變?yōu)樽杂芍涞臅r(shí)間較多，但是學(xué)生具有的知識(shí)都是最基礎(chǔ)的知識(shí)，自學(xué)的能力較差，學(xué)習(xí)的目標(biāo)也不夠明確。但是，高職生畢竟還是在校生，需要按照學(xué)校的安排修完所有課程，通過(guò)課堂學(xué)習(xí)掌握了一定的課程專業(yè)知識(shí)，但這些遠(yuǎn)不能滿足高職學(xué)生培養(yǎng)專業(yè)技能的需求；他們具有強(qiáng)烈的自我提高需求。移動(dòng)學(xué)習(xí)系統(tǒng)學(xué)習(xí)資源庫(kù)中的微視頻教材為高職學(xué)生提供了真實(shí)的實(shí)踐情境，使學(xué)生無(wú)需到達(dá)工程實(shí)踐現(xiàn)場(chǎng)就能夠接觸到實(shí)踐過(guò)程和實(shí)踐細(xì)節(jié)，從而在理論與實(shí)踐之間建立起橋梁，幫助構(gòu)建對(duì)實(shí)踐過(guò)程的復(fù)雜性、理論如何轉(zhuǎn)變?yōu)橛行?shí)踐的深入理解，真正實(shí)現(xiàn)理論與實(shí)踐的結(jié)合，豐富了學(xué)生的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，使得學(xué)生在未來(lái)的實(shí)踐中能夠根據(jù)以往微視頻教材中獲取的知識(shí)來(lái)采取行動(dòng)，提高了學(xué)生分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力。因此，大塊的自由時(shí)間還是不多，但片段的學(xué)習(xí)時(shí)間比比皆是。
（二）移動(dòng)微型學(xué)習(xí)模式適合高職生的學(xué)習(xí)
移動(dòng)微型學(xué)習(xí)的廣泛性，表現(xiàn)在任何時(shí)間、任何地點(diǎn)都可以進(jìn)行靈活地學(xué)習(xí)，因?yàn)閷W(xué)習(xí)的內(nèi)容都是微小的內(nèi)容塊，能夠隨時(shí)嵌入生活中去，可以利用正規(guī)學(xué)習(xí)之間的空余時(shí)間。高職學(xué)生有更多的零碎時(shí)間，在宿舍、在教室、在食堂，排隊(duì)的時(shí)候、等人的時(shí)候等，都可以用來(lái)學(xué)習(xí)，獲取知識(shí)。移動(dòng)微型學(xué)習(xí)可以組織學(xué)習(xí)者利用移動(dòng)終端設(shè)備和各專家進(jìn)行無(wú)障礙的信息交流，學(xué)習(xí)者可以參與到學(xué)習(xí)過(guò)程中，暢所欲言，一定程度上提高了學(xué)習(xí)者的學(xué)習(xí)興趣。而且學(xué)習(xí)者可以根據(jù)自己的興趣選擇要學(xué)習(xí)的內(nèi)容、時(shí)間、地點(diǎn)和方式，高職學(xué)生更愿意在自己感興趣的知識(shí)領(lǐng)域開展研究，他們有著強(qiáng)烈的求知欲，會(huì)找空余時(shí)間，通過(guò)各種渠道進(jìn)行學(xué)習(xí)，而且對(duì)于高職學(xué)生來(lái)說(shuō)，也樂(lè)于嘗試和接受移動(dòng)微型學(xué)習(xí)這種新穎的學(xué)習(xí)模式，并且會(huì)促進(jìn)這一模式的發(fā)展。
三、《電子商務(wù)實(shí)務(wù)》課程移動(dòng)微型學(xué)習(xí)資源開發(fā)設(shè)計(jì)的原則
（一）學(xué)習(xí)內(nèi)容的微型化
與傳統(tǒng)的學(xué)習(xí)模擬相比，移動(dòng)微型學(xué)習(xí)沒(méi)有固定的時(shí)間要求，學(xué)生只需抽出零碎的時(shí)間片段，也沒(méi)有穩(wěn)定的學(xué)習(xí)環(huán)境的要求，任何地點(diǎn)都可以成為學(xué)習(xí)場(chǎng)所，學(xué)生對(duì)于學(xué)習(xí)內(nèi)容的要求不會(huì)太多，只需要設(shè)計(jì)碎片化和模塊化的知識(shí)點(diǎn)作為移動(dòng)微型學(xué)習(xí)的資源。根據(jù)腦科學(xué)研究表明，人集中注意力的時(shí)間一般為10分鐘左右，根據(jù)這一理論，移動(dòng)微型學(xué)習(xí)的時(shí)間應(yīng)該設(shè)在10分鐘以內(nèi)，主要起強(qiáng)化效果，提高學(xué)生的學(xué)習(xí)效率。因此，在設(shè)計(jì)《電子商務(wù)實(shí)務(wù)》學(xué)習(xí)內(nèi)容時(shí)，應(yīng)該以課程標(biāo)準(zhǔn)的要求，針對(duì)課程標(biāo)準(zhǔn)中設(shè)計(jì)的教學(xué)模塊，每個(gè)模塊下又包含著不同的任務(wù)，在每個(gè)任務(wù)中設(shè)計(jì)一個(gè)知識(shí)點(diǎn)，以便于學(xué)生能夠在10分鐘內(nèi)容完成這個(gè)任務(wù)的知識(shí)延伸，學(xué)生也可以根據(jù)自己的學(xué)習(xí)興趣和學(xué)習(xí)安排選擇相應(yīng)的學(xué)習(xí)任務(wù)，完成學(xué)習(xí)。
（二）以學(xué)生需求為中心
移動(dòng)微型學(xué)習(xí)應(yīng)充分發(fā)揮學(xué)生的主體性，以學(xué)生需求為中心，設(shè)計(jì)的學(xué)習(xí)資源應(yīng)該了解學(xué)生在學(xué)習(xí)過(guò)程中的重難點(diǎn)，教師在教學(xué)的過(guò)程中可以調(diào)研學(xué)生的興趣點(diǎn)，以及學(xué)習(xí)過(guò)程中的掌握情況，然后根據(jù)實(shí)際情況，引入企業(yè)的真實(shí)案例，現(xiàn)如今，電子商務(wù)深入學(xué)生的學(xué)習(xí)和生活領(lǐng)域，學(xué)生利用移動(dòng)終端設(shè)備每時(shí)每刻都在享受著信息技術(shù)發(fā)展帶給他們的新生活，因此引入真實(shí)案例，讓學(xué)生能夠利用片段時(shí)間去分析和研究案例，鞏固課堂中的知識(shí)點(diǎn)，這樣的學(xué)習(xí)資源應(yīng)該更受學(xué)生的歡迎。在建設(shè)《電子商務(wù)實(shí)務(wù)》移動(dòng)微型學(xué)習(xí)資源之前，可以對(duì)學(xué)生的學(xué)習(xí)動(dòng)機(jī)、知識(shí)結(jié)構(gòu)和學(xué)習(xí)期望進(jìn)行詳細(xì)調(diào)研，設(shè)計(jì)開發(fā)出更加符合學(xué)生需求的學(xué)習(xí)資源。
（三）學(xué)習(xí)資源的實(shí)用性和多樣性
學(xué)生希望能夠通過(guò)片段時(shí)間達(dá)到學(xué)習(xí)的目的，在如今這個(gè)社會(huì)，終身學(xué)習(xí)已經(jīng)是一種趨勢(shì)，每個(gè)人都需要不斷地學(xué)習(xí)，也都處于移動(dòng)微型學(xué)習(xí)的環(huán)境之下。在進(jìn)行移動(dòng)微型學(xué)習(xí)資源開發(fā)設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)考慮實(shí)用性的原則，開發(fā)《電子商務(wù)實(shí)務(wù)》移動(dòng)微型學(xué)習(xí)資源時(shí)，盡可能地了解學(xué)生對(duì)于課程重難點(diǎn)的掌握情況，對(duì)于核心知識(shí)內(nèi)容的理解。同時(shí)學(xué)習(xí)資源設(shè)計(jì)時(shí)還應(yīng)該設(shè)計(jì)不同形式的資源，結(jié)合圖片、視頻、文本、動(dòng)畫等多種媒體資源的優(yōu)點(diǎn)來(lái)設(shè)計(jì)，達(dá)到學(xué)習(xí)效果的最優(yōu)化。
四、《電子商務(wù)實(shí)務(wù)》課程移動(dòng)微型學(xué)習(xí)資源的開發(fā)研究
數(shù)字移動(dòng)技術(shù)的高速發(fā)展，出現(xiàn)了很多種移動(dòng)終端設(shè)備，如筆記本電腦、智能手機(jī)、iPad等等，這些終端設(shè)備輕巧、易攜帶，價(jià)格越來(lái)越便宜，越來(lái)越受高職學(xué)生的追捧。蘇州健雄職業(yè)技術(shù)學(xué)院絕大多數(shù)的學(xué)生利用移動(dòng)終端設(shè)備實(shí)現(xiàn)了和同伴、家人之間的溝通聯(lián)系，同時(shí)也實(shí)現(xiàn)了移動(dòng)微型學(xué)習(xí)，他們實(shí)現(xiàn)微型學(xué)習(xí)的方式也是多種多樣的，有使用QQ和電子郵件的，也有使用微博、微信等等。針對(duì)他們所使用的APP，《電子商務(wù)實(shí)務(wù)》課程組開發(fā)了以下學(xué)習(xí)資源：
（一）開發(fā)電子商務(wù)內(nèi)容的電腦屏保
大部分學(xué)生都擁有自己的筆記本電腦，他們利用筆記本電腦完成作業(yè)，進(jìn)行娛樂(lè)活動(dòng)，針對(duì)這一情況，可以根據(jù)電子商務(wù)發(fā)展過(guò)程的電商名人、比較經(jīng)典的案例，設(shè)計(jì)特殊的筆記本電腦屏保，當(dāng)電腦閑置時(shí)，啟動(dòng)特殊的屏保程序，學(xué)生就可以根據(jù)自己的興趣愛好，自己去尋找相關(guān)資料進(jìn)行學(xué)習(xí)。
（二）開發(fā)電子商務(wù)內(nèi)容的手機(jī)閱讀
蘇州健雄職業(yè)技術(shù)學(xué)院擁有圖書館的微信公眾號(hào)，學(xué)生可以通過(guò)公眾號(hào)查詢到相關(guān)的電子商務(wù)參考書籍進(jìn)行閱讀，同時(shí)可以將電子書籍下載到手機(jī)上，圖書信息每日更新，內(nèi)容多樣，學(xué)生辦理的手機(jī)4G網(wǎng)絡(luò)，可以實(shí)現(xiàn)閱讀自由暢享，享受隨身閱讀樂(lè)趣。健雄學(xué)院校園內(nèi)都有無(wú)線網(wǎng)絡(luò)，學(xué)生隨時(shí)可以升級(jí)手機(jī)APP的版本、功能和速度，可以滿足學(xué)生的各種需求。
（三）開發(fā)微信平臺(tái)新聞推送
現(xiàn)階段，學(xué)生使用微信的頻率逐漸增加，除了利用微信進(jìn)行溝通交流，也可以利用微信獲取更多的知識(shí)，課程組針對(duì)這一特征，在微信上開發(fā)了《電子商務(wù)實(shí)務(wù)》公眾號(hào)，利用微信公眾號(hào)推送電子商務(wù)新聞和課程的相關(guān)信息，新聞可以幫助學(xué)生拓寬知識(shí)面，提高學(xué)生學(xué)習(xí)的興趣。
（四）開發(fā)微博、BBS話題實(shí)時(shí)討論
經(jīng)過(guò)調(diào)研，蘇州健雄職業(yè)技術(shù)學(xué)院97.6%的學(xué)生都擁有自己的微博，同時(shí)健雄學(xué)院還擁有一個(gè)BBS，學(xué)生經(jīng)常在論壇和貼吧上討論事情，針對(duì)這點(diǎn)，課程組定期在微博和BBS上發(fā)起話題的實(shí)時(shí)討論，討論的內(nèi)容可以是電子商務(wù)的一張圖片、一段文本、一個(gè)小動(dòng)畫、一則新聞、一段視頻等等，學(xué)生可以結(jié)合理論知識(shí)發(fā)表自己的言論，暢所欲言。
（五）建設(shè)《電子商務(wù)實(shí)務(wù)》空中課堂
手機(jī)閱讀、微信平臺(tái)推送、微博和BBS話題討論的學(xué)習(xí)內(nèi)容都很短小，學(xué)生的學(xué)習(xí)狀態(tài)也是非連續(xù)性的，學(xué)習(xí)資源設(shè)計(jì)也是短小的，一方面是由移動(dòng)終端設(shè)備的存儲(chǔ)容量和數(shù)據(jù)傳輸能力造成的，另一方面，高職生進(jìn)行微型學(xué)習(xí)的時(shí)間片段沒(méi)有那么長(zhǎng)。可以將學(xué)習(xí)任務(wù)分解成一個(gè)個(gè)的小模塊，不必短時(shí)間將所有內(nèi)容記住，而是每隔一段時(shí)間，學(xué)習(xí)記憶一個(gè)短小的內(nèi)容片斷。但是學(xué)生有時(shí)候需要一個(gè)連續(xù)學(xué)習(xí)的模式，因此課程組開發(fā)了《電子商務(wù)實(shí)務(wù)》的空中課堂，內(nèi)容包括課程在教學(xué)過(guò)程中的課程內(nèi)容的多媒體課件、與課程相關(guān)的大型的音頻和視頻資源、學(xué)生需要提交的作業(yè)，開發(fā)空中課堂可以解決平時(shí)課堂學(xué)習(xí)中的疑問(wèn)或者設(shè)計(jì)學(xué)生感興趣的形式多樣的課外知識(shí)，完成預(yù)定的學(xué)習(xí)目標(biāo)。
結(jié)語(yǔ)
移動(dòng)通信技術(shù)的高速發(fā)展促使了高職學(xué)生的課外學(xué)習(xí)的方式，學(xué)生對(duì)于這種隨意、片段的移動(dòng)微型學(xué)習(xí)也是越來(lái)越喜歡，參與性越來(lái)越強(qiáng)，本研究的實(shí)踐意義在于著眼于適應(yīng)崗位需要的關(guān)鍵能力的培養(yǎng)，按照職業(yè)能力開發(fā)的理論，為高職市場(chǎng)營(yíng)銷專業(yè)人才電子商務(wù)能力的培養(yǎng)和課程開發(fā)提供有價(jià)值和可操作性的參考，高職學(xué)生移動(dòng)微型學(xué)習(xí)未來(lái)發(fā)展走向以及對(duì)非正式學(xué)習(xí)有效支持等諸多理論與實(shí)踐問(wèn)題還需要進(jìn)一步的摸索，在以后的研究中將給予密切的關(guān)注與探索。
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關(guān)鍵詞人參皂苷Rb2； 藥代動(dòng)力學(xué)； 代謝產(chǎn)物； 液相色譜四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜
1引 言
人參皂苷Rb2為人參（Panax ginseng C. A. Mey.）的主要活性成分之一， 含量約為6.7 mg/g[1]。研究表明， 人參皂苷Rb2能抑制地塞米松引起的細(xì)胞凋亡作用[2]， 對(duì)于小鼠在輻照誘導(dǎo)的造血系統(tǒng)損傷具有保護(hù)作用[3]。人參皂苷Rb2能夠降低在高膽固醇或脂肪酸培養(yǎng)下的3T3L1脂肪細(xì)胞的膽固醇和三酰甘油的含量[4]。另外， 人參皂苷Rb2對(duì)物質(zhì)代謝亦有一定的影響， 能夠通過(guò)AMPK介導(dǎo)抑制糖原異生作用[5]； 能明顯增加大鼠骨髓細(xì)胞DNA、蛋白質(zhì)的合成， 促進(jìn)血清蛋白質(zhì)合成等活性[6～10]。人參皂苷在胃腸道中和酸性條件下會(huì)產(chǎn)生多種代謝和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物， 包括人參皂苷Rg3和CK等具有活性的化合物[11～13]。因此人參皂苷的藥代動(dòng)力學(xué)、生物和化學(xué)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物研究也一直備受關(guān)注， 對(duì)于揭示人參皂苷的藥理作用和物質(zhì)基礎(chǔ)有重要意義， 并且直接影響人參的開發(fā)應(yīng)用。Karikura等[14，15]對(duì)于人參皂苷Rb2在大鼠大腸和胃中的代謝情況進(jìn)行了研究， 鑒定了氧化和去糖基化代謝產(chǎn)物。有文獻(xiàn)針對(duì)口服后復(fù)方中人參皂苷Rb1、柚皮苷和人參皂苷Rb2進(jìn)行了藥代動(dòng)力學(xué)研究[16]。但對(duì)于人參皂苷Rb2單體的大鼠體內(nèi)代謝動(dòng)力學(xué)和代謝產(chǎn)物未見報(bào)道。為了獲得人參皂苷Rb2在生物體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)， 更好地理解其在生物體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化和排泄途徑， 本研究將利用RRLCQTOF MS聯(lián)用技術(shù)對(duì)大鼠靜脈注射和口服人參皂苷Rb2后的血漿、尿液、糞便進(jìn)行檢測(cè)， 計(jì)算靜脈注射后相關(guān)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)并分析鑒定其代謝產(chǎn)物。為深入研究開發(fā)人參皂苷Rb2提供理論基礎(chǔ)， 對(duì)進(jìn)一步闡明人參皂苷Rb2的生物活性提供依據(jù)。
2實(shí)驗(yàn)部分
2.1儀器與試劑
6520RRLCQTOF質(zhì)譜儀（美國(guó)安捷倫公司）； 5804R臺(tái)式高速大容量冷凍離心機(jī)（德國(guó)Eppendorf公司）； ULT13863V41超低溫冰箱（美國(guó)Thermo公司）； 超純水機(jī)（美國(guó)Millipore公司）。人參皂苷Rb2， Rf， F2， CK固體對(duì)照品（吉林大學(xué)， 純度95%）； 甲醇、乙腈和甲酸（色譜純， 美國(guó)TEDIA公司）； Wistar大鼠（體重（200 ± 10）g， 雄性， 購(gòu)自吉林大學(xué)）。
2.2實(shí)驗(yàn)條件
2.2.1色譜條件Agilent SBC18色譜柱（100 mm× 3.0 mm， 1.8 μm， 600 bar）， 柱溫25℃； 采用二元線性梯度洗脫： 流動(dòng)相A為0.1%甲酸溶液， B為乙腈。梯度洗脫： 0～13 min， 25%～46% B； 13～19 min， 46%～50% B； 19～22 min， 50%～90% B； 22～25 min， 90% B。進(jìn)樣量為5 μL。
2.2.2質(zhì)譜條件采用電噴霧負(fù)離子模式； 質(zhì)量掃描范圍m/z 100～2200； 干燥氣流速（N2）為8.0 L/min； 干燥氣溫度為350℃； 霧化氣壓力為255 kPa； 碰撞電壓為3500 V， 裂解電壓為175 V， 錐孔電壓65 V。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用安捷倫Masshunter軟件（B.03.01版本）進(jìn)行分析。
2.3樣品的配制及樣品處理
以甲醇為溶劑將Rb2和Rf（內(nèi)標(biāo)）標(biāo)準(zhǔn)品分別配制為100和10 μg/mL的對(duì)照品母液。4℃冷藏備用， 實(shí)驗(yàn)時(shí)用甲醇稀釋。將不同濃度的Rb2對(duì)照品母液和Rf工作液各100 μL， 加入100 μL 空白大鼠血漿中混勻， 再加入200 μL甲醇， 渦旋1 min沉淀血漿中蛋白， 離心5 min， 取上清放入另一試管中， 最終配制成相當(dāng)于Rb2濃度為0.08， 0.1， 0.2， 0.4， 0.6， 0.8， 1.0和1.3 μg/mL的血漿標(biāo)準(zhǔn)液。
2.4驗(yàn)方法
選取6只大鼠分別用于Rb2靜脈注射給藥， 給藥方式為尾靜脈注射， 給藥劑量為2mg/kg。分別于給藥前（0時(shí)）和給藥后2， 5， 10， 15， 20， 30， 40， 60和90 min和2， 4， 6， 8， 12及24 h目?jī)?nèi)眥取血， 每個(gè)時(shí)間點(diǎn)取血0.5 mL， 血液冷卻后3000 r/min離心10 min， 取上清血漿100 μL， 測(cè)定前加入100 μL Rf內(nèi)標(biāo)液和300 μL甲醇， 渦旋30 s， 靜置5 min， 離心10 min。取上清液， 裝瓶， 待測(cè)。
選取6只大鼠， 隨機(jī)分為Rb2靜脈注射組和口服組， 每組3只， 靜脈注射劑量為2 mg/kg， 口服劑量為50 mg/kg， 制備方法同上。以上動(dòng)物給藥后均放入代謝籠中收集尿液（0～24 h）和糞便（0～24 h）， 尿液樣本收集后， 經(jīng)氮?dú)獯蹈蓾饪s， 水飽和正丁醇萃取， 萃取液再用氮?dú)獯蹈桑?經(jīng)過(guò)80%甲醇提取后， 用0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾， 最后用80%甲醇定容至1 mL， 待測(cè)； 糞便樣本收集后進(jìn)行研磨粉碎， 加入50 mL水溶解， 再用100 mL水飽和正丁醇分3次萃取， 萃取液放置蒸發(fā)皿中， 置水浴鍋上蒸干， 然后用80%甲醇溶解并定容至1 mL， 待測(cè)。
3Y果與討論
3.1RRLCQTOFMS和MS/MS方法的優(yōu)化
利用人參皂苷Rb2進(jìn)行RRLCQTOFMS和MS/MS的檢測(cè)方法優(yōu)化。Rb2是二醇型人參皂苷（圖1）， 在苷元的C3位和C20位分別為葡萄糖葡萄糖和葡萄糖阿拉伯糖取代。分別在RRLCQTOFMS正離子和負(fù)離子模式下進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定的準(zhǔn)分子離子和碎片離子的誤差小于10 ppm（圖2A）， 在下文中討論的離子的m/z數(shù)值均用整數(shù)表示。在0.1%甲酸水溶液作為流動(dòng)相的條件下， Rb2在負(fù)離子模式下分別給出[M-H]
3.2方法學(xué)考察
3.2.1專屬性通過(guò)比較空白與加入Rb2和內(nèi)標(biāo)的血漿樣本的LCMS色譜考察本實(shí)驗(yàn)的專屬性。人參皂苷Rb2和內(nèi)標(biāo)Rf的選擇性良好， 生物基質(zhì)的干擾較小， Rb2和內(nèi)標(biāo)Rf的保留時(shí)間分別為10.08 min和10.57 min。
3.2.2線性關(guān)系用Rb2/內(nèi)標(biāo)Rf的峰面積比值（Y）與Rb2含量（X）進(jìn)行最小二乘線性回歸， 得到標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為Y=3.5174X+0.117， R2=0.9937。結(jié)果顯示在0.10～1.26 μg/mL的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好， 檢出限（S/N=3）和定量限（S/N=10）分別為0.08和0.10 μg/mL。
3.2.3精密度與準(zhǔn)確度采用高、中、低3個(gè)濃度的Rb2血漿QC樣本， 每個(gè)濃度進(jìn)行6個(gè)樣本分析， 連續(xù)測(cè)定3天。計(jì)算日內(nèi)和日間精密度和準(zhǔn)確度。日內(nèi)和日間精密度的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差別（RSD）均小于5%， 表明本方法的精密度和準(zhǔn)確度良好。
3.2.4提取回收率分別取Rb2高、中、低3個(gè)濃度的QC樣本， 將空白血漿中先加入Rb2， 處理后計(jì)算所測(cè)得峰面積， 與空白血漿處理后加入相同量Rb2所測(cè)得峰面積比值的百分率進(jìn)行比較， 考察樣品的提取回收率。結(jié)果表明， Rb2提取回收率范圍為92.6%～93.4%， RSD小于15%。
4結(jié) 論
本研究建立了人參皂苷Rb2的RRLCQTOFMS 和MS/MS藥代動(dòng)力學(xué)和代謝產(chǎn)物研究方法。藥代動(dòng)力學(xué)研究表明人參皂苷Rb2體內(nèi)分布代謝符合二室模型， 血藥濃度半衰期的α相（t1/2α）和β相（t1/2β）分別為（23.576±1.103）min和（1306.545±147.226）min， 在體內(nèi)有較高的血漿蛋白結(jié)合率。α相分布較快， 而β相的消除較緩慢。運(yùn)用優(yōu)化后的RRLCQTOFMS/MS方法， 對(duì)靜脈注射和口服后人參皂苷Rb2的代謝產(chǎn)物進(jìn)行了系統(tǒng)研究。結(jié)果表明， 去糖基化是人參皂苷Rb2在大鼠體內(nèi)主要的代謝方式。鑒定了代謝產(chǎn)物M6、M2（CY）、F2和CK， 總結(jié)了大鼠在靜脈注射和口服給藥后Rb2尿液和糞便的代謝路徑， 分別為Rb2M6M2和Rb2M6M2（CY）/F2CK代謝途徑。人參皂苷Rb2的藥代動(dòng)力學(xué)研究和體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化研究結(jié)果為更好地理解和開發(fā)人參皂苷Rb2的應(yīng)用價(jià)值提供了理論基礎(chǔ)。
所謂數(shù)學(xué)模型，是指由字母、數(shù)字和其他數(shù)學(xué)符號(hào)構(gòu)成的等式或不等式，或用圖表、圖像、框圖、數(shù)理邏輯等來(lái)描述系統(tǒng)的特征及其內(nèi)部或外部聯(lián)系的模型。在教學(xué)實(shí)踐中，數(shù)學(xué)模型的建構(gòu)過(guò)程可以滲透于數(shù)與代數(shù)、空間與圖形等教學(xué)內(nèi)容中，尤其是，在數(shù)學(xué)綜合運(yùn)用中，模型建構(gòu)有著至關(guān)重要的作用。同時(shí)，數(shù)學(xué)模型的建構(gòu)總是與數(shù)學(xué)探究活動(dòng)聯(lián)系在一起的，如何引導(dǎo)學(xué)生構(gòu)建基于數(shù)學(xué)活動(dòng)經(jīng)驗(yàn)的數(shù)學(xué)模型，值得我們進(jìn)行深入的思考。本文以“物體浸沒(méi)水中的體積問(wèn)題”的教學(xué)為例，談一談自己的教學(xué)實(shí)踐與思考。
一、組織探究活動(dòng)，獲得數(shù)學(xué)活動(dòng)經(jīng)驗(yàn)
史寧中教授認(rèn)為，“基本活動(dòng)經(jīng)驗(yàn)是指學(xué)生直接或間接經(jīng)歷了活動(dòng)過(guò)程而獲得的經(jīng)驗(yàn)”。在教學(xué)“長(zhǎng)方體與正方體體積”后，筆者發(fā)現(xiàn)，雖然學(xué)生掌握了求長(zhǎng)方體、正方體體積的方法，但是對(duì)體積公式的綜合運(yùn)用（如物體浸沒(méi)水中的問(wèn)題），則顯得有些力不從心，例如：一個(gè)長(zhǎng)方體玻璃魚缸，長(zhǎng)25厘米，寬16厘米，高20厘米，在魚缸中放入一個(gè)棱長(zhǎng)10厘米的正方體鐵塊，使它全部浸沒(méi)在水中，水面會(huì)上升多少厘米？學(xué)生普遍感覺(jué)解決此題有困難，因?yàn)樵谶@一問(wèn)題情境中，正方體浸沒(méi)水中時(shí)存在一個(gè)動(dòng)態(tài)變化的過(guò)程（即水面上升，總體積的變化），學(xué)生由于缺乏相應(yīng)的數(shù)學(xué)活動(dòng)經(jīng)驗(yàn)，難以把握情境中的各部分?jǐn)?shù)量間的關(guān)系。
要讓學(xué)生真正地理解和掌握物體浸沒(méi)水中的相關(guān)問(wèn)題，就必須讓學(xué)生親歷這一變化過(guò)程，為此，教師可引導(dǎo)學(xué)生開展如下探究活動(dòng)：
1．給每個(gè)小組準(zhǔn)備一個(gè)長(zhǎng)方體容器，一個(gè)雞蛋，引導(dǎo)學(xué)生思考，想要測(cè)得雞蛋的體積，可以怎么做？
2．學(xué)生分小組進(jìn)行探究實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行交流匯報(bào)。
在探究活動(dòng)中，學(xué)生通過(guò)參與數(shù)學(xué)活動(dòng)，經(jīng)歷“做數(shù)學(xué)”的過(guò)程和思考的過(guò)程，從而將探究“物體浸沒(méi)水中”問(wèn)題的經(jīng)歷變成了數(shù)學(xué)活動(dòng)的經(jīng)驗(yàn)。
二、引領(lǐng)數(shù)學(xué)思考，提煉構(gòu)建數(shù)學(xué)模型
《數(shù)學(xué)課程標(biāo)準(zhǔn)》指出，教師要引導(dǎo)學(xué)生從已有的經(jīng)驗(yàn)出發(fā)，讓學(xué)生親身經(jīng)歷將實(shí)際問(wèn)題抽象成數(shù)學(xué)模型并進(jìn)行解釋與應(yīng)用的過(guò)程。
在“物體浸沒(méi)水中的體積問(wèn)題”的教學(xué)中，教師可以引導(dǎo)學(xué)生借助圖形展開觀察、分析、概括、提煉等一系列數(shù)學(xué)思考活動(dòng)：1．將雞蛋浸沒(méi)于水中后，雞蛋的體積相當(dāng)于哪一部分水的體積?2．上升部分水的體積與長(zhǎng)方體容器有什么聯(lián)系，你怎樣計(jì)算上升水的體積？3．如果放入的物體是一個(gè)馬鈴薯或其他不規(guī)則物體，你能用一個(gè)公式表示如何計(jì)算它的體積嗎?4．除了將雞蛋浸沒(méi)水中，求上升的水的體積外，我們還可以怎樣測(cè)得雞蛋的體積？
通過(guò)思考與交流，學(xué)生不僅發(fā)現(xiàn)雞蛋體積的測(cè)量方法，還在分析思考中發(fā)現(xiàn)了這一方法的普遍適用性，抽象出相應(yīng)的數(shù)學(xué)模型V雞蛋=V上升。而“還可以怎樣測(cè)得雞蛋的體積”則引導(dǎo)學(xué)生實(shí)現(xiàn)對(duì)數(shù)學(xué)模型的拓展。
三、變換問(wèn)題情境，把握模型內(nèi)在結(jié)構(gòu)
事實(shí)上，學(xué)生通過(guò)對(duì)某一個(gè)問(wèn)題情境活動(dòng)經(jīng)驗(yàn)的分析概括，初步地建構(gòu)數(shù)學(xué)模型，這樣的模型顯然有一定的局限性。 如在“物體浸沒(méi)水中的體積問(wèn)題”的教學(xué)中，教師可設(shè)計(jì)如下兩個(gè)變式問(wèn)題，讓學(xué)生繼續(xù)探究，進(jìn)而逐步把握數(shù)學(xué)模型的內(nèi)在結(jié)構(gòu)：
1．在一個(gè)棱長(zhǎng)10厘米的正方體容器中，放入一個(gè)長(zhǎng)5厘米、寬4厘米的長(zhǎng)方體鐵塊，使其完全浸沒(méi)后，水面上升0.6厘米，求長(zhǎng)方體鐵塊的高。
2.-個(gè)長(zhǎng)方體玻璃容器，從里面量，長(zhǎng)和寬均為2分米，高是3.5分米。向容器中倒入6升的水，再將一個(gè)蘋果浸沒(méi)水中。這時(shí)量得水深是1.55分米。這個(gè)蘋果的體積是多少？
在上述兩個(gè)變式的問(wèn)題情境中，學(xué)生發(fā)現(xiàn)，無(wú)論情境中的條件怎樣變化，鐵塊或蘋果的體積始終等于上升部分水的體積。這樣，學(xué)生也就在變式訓(xùn)練中把握了數(shù)學(xué)模型的內(nèi)在結(jié)構(gòu)。
