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序論：在您撰寫用藥護(hù)理論文時，參考他人的優(yōu)秀作品可以開闊視野，小編為您整理的7篇范文，希望這些建議能夠激發(fā)您的創(chuàng)作熱情，引導(dǎo)您走向新的創(chuàng)作高度。
收集我院2011年6月至2014年6月兒科上報(bào)的用藥錯誤護(hù)理不良事件和院科兩級護(hù)理質(zhì)量檢查中發(fā)現(xiàn)的用藥安全隱患共32例，分析其原因并提出對策。
2結(jié)果
32例兒科護(hù)理用藥錯誤引起的不良事件或安全隱患的原因?yàn)?執(zhí)行醫(yī)囑錯誤11例(34.4%)，未嚴(yán)格執(zhí)行查對制度8例(25.0%)，操作不規(guī)范6例(18.8%)，護(hù)士職業(yè)素質(zhì)因素4例(12.5%)，實(shí)習(xí)帶教不嚴(yán)格2例(6.3%)，藥品過期1例(3.1%)。
3討論
3.1原因分析3.1.1執(zhí)行醫(yī)囑錯誤(1)主班護(hù)士處理醫(yī)囑時注意力不集中，常被其他事情干擾(如接待來訪者、接聽電話、處理呼叫器等)，將醫(yī)囑轉(zhuǎn)抄到執(zhí)行單和輸液卡時，易誤抄漏抄;(2)兒科醫(yī)囑復(fù)雜、變化多，特別是臨時醫(yī)囑多時醫(yī)護(hù)疏于溝通，導(dǎo)致醫(yī)囑處理不及時或護(hù)士執(zhí)行錯誤;(3)責(zé)任護(hù)士正忙時，有臨時醫(yī)囑需其執(zhí)行的，主班護(hù)士未交待清楚;(4)個別護(hù)士違規(guī)執(zhí)行口頭醫(yī)囑。此外，兒科護(hù)士工作強(qiáng)度大也是醫(yī)囑執(zhí)行錯誤的一個重要原因［4］。
3.1.2未嚴(yán)格執(zhí)行查對制度(1)護(hù)士未能做到每班認(rèn)真查對醫(yī)囑，或查對時未做到醫(yī)囑單、電腦、執(zhí)行單、輸液卡或口服藥卡的四核對，導(dǎo)致不能及時發(fā)現(xiàn)醫(yī)囑執(zhí)行錯誤;(2)配制藥物時未認(rèn)真查對，導(dǎo)致藥品拿錯、配錯;(3)在給藥前、中、后未認(rèn)真查對藥品和患兒身份，導(dǎo)致發(fā)錯藥、打錯針、換錯液體等。
3.1.3操作不規(guī)范(1)兒科輸液分組多，有的護(hù)士常簡化操作程序，一次配制多組液體，導(dǎo)致配制好的藥物放置時間長，增加輸液反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn);(2)兒科用藥劑量計(jì)算復(fù)雜，容易計(jì)算錯誤而致劑量不準(zhǔn)確;(3)溶媒選用不當(dāng);(4)使用雙頭輸液器時，同時開放兩組液體，導(dǎo)致藥物相互作用，如酚妥拉明與地塞米松、果糖二磷酸鈉與10%葡萄糖酸鈣同時輸入會出現(xiàn)混濁、變色現(xiàn)象;(5)靜脈滴注速度控制不合理，如脫水患兒需快速補(bǔ)液，而新生兒、心肺疾病患兒則需嚴(yán)格控制滴速，過快會發(fā)生肺水腫等嚴(yán)重后果;(6)藥物用法不適宜［5］;(7)在未詢問清楚藥物過敏史的情況下，未行藥物過敏試驗(yàn)。
3.1.4護(hù)士職業(yè)素質(zhì)因素(1)責(zé)任護(hù)士對分管患兒病情、用藥不完全了解，未向患兒進(jìn)行用藥指導(dǎo)，使患兒用藥依從性下降;(2)口服藥未做到監(jiān)督用藥，患兒易漏服;(3)護(hù)士交接班不詳細(xì)，對特殊時間用藥、特殊用藥或未及時用藥的患兒未認(rèn)真交接，導(dǎo)致?lián)Q班后患兒藥品漏用或錯用;(4)兒科護(hù)士藥學(xué)知識欠缺，對藥品注意事項(xiàng)、不良反應(yīng)、配伍禁忌等了解不夠，不能科學(xué)地指導(dǎo)患兒用藥，不能合理地安排靜脈輸液順序，不能及時、全面地觀察藥物治療效果及不良反應(yīng)。
3.1.5實(shí)習(xí)帶教不嚴(yán)格有的實(shí)習(xí)生帶教老師不嚴(yán)格，常讓實(shí)習(xí)生單獨(dú)操作，增加了用藥安全風(fēng)險(xiǎn)。
3.1.6病房藥品管理因素(1)科室藥品未按要求進(jìn)行管理，備用藥品未進(jìn)行不定期清點(diǎn)、檢查，導(dǎo)致藥品過期;(2)應(yīng)該冷藏的藥品未放入冰箱保存，需避光的未避光保存，使藥品失效;(3)急救藥品未按“四定”管理，班班交接，影響急救用藥;(4)高濃度藥品未單獨(dú)分類保管，藥物未入原裝盒或多種藥混放一起，容易出錯;(5)毒性、品未專柜、專鎖管理，存在隱患。
3.1.7其他如工作環(huán)境因素等。兒科護(hù)士在操作中常伴隨著患兒的哭鬧和躁動，除要付出較大的體力外，還要承擔(dān)沉重的心理壓力，影響其判斷力和操作準(zhǔn)確性［6，7］。
3.2管理對策
3.2.1加強(qiáng)規(guī)章制度的落實(shí)力度貫徹落實(shí)規(guī)章制度是保障用藥安全的前提，具體措施:(1)重新優(yōu)化醫(yī)囑核對及處理流程，各班護(hù)士認(rèn)真落實(shí)執(zhí)行醫(yī)囑制度和查對制度;(2)進(jìn)一步明確主班護(hù)士工作職責(zé)，對重整醫(yī)囑、新醫(yī)囑、特殊用藥及在轉(zhuǎn)抄執(zhí)行單和輸液卡時實(shí)行雙人核對;(3)加強(qiáng)醫(yī)護(hù)溝通，在執(zhí)行醫(yī)囑時遇到疑問必須詢問清楚，一般不執(zhí)行口頭醫(yī)囑，必需執(zhí)行口頭醫(yī)囑時，要求復(fù)述兩遍雙方確認(rèn)無誤后方能執(zhí)行;(4)加強(qiáng)責(zé)任護(hù)士責(zé)任意識，盡量讓患兒不出病房就能解決問題，減少呼叫器響鈴和患兒家長到護(hù)士站詢問的次數(shù)，減少主班護(hù)士處理醫(yī)囑時的干擾因素;(5)每天做到對全病區(qū)所有醫(yī)囑認(rèn)真查對，同時核對第二天輸液卡后再行擺藥，擺藥時要雙人查對，尤其注意查對早、中、夜班產(chǎn)生的新醫(yī)囑，及時發(fā)現(xiàn)、補(bǔ)救用藥問題;(6)用藥前、中、后要嚴(yán)格落實(shí)“三查七對”，杜絕錯、少、漏用藥發(fā)生;(7)在護(hù)士站，全院統(tǒng)一制作了安全信息提示板，把需在下一班使用的特殊用藥、特殊時間用藥在上面作好登記，每班交班前要認(rèn)真查對所有藥物治療落實(shí)情況，同時做好床邊交接班，嚴(yán)防遺漏。
3.2.2嚴(yán)格遵守用藥操作規(guī)范(1)認(rèn)真執(zhí)行無菌操作規(guī)范，液體現(xiàn)配現(xiàn)用，預(yù)防藥物污染、變質(zhì);(2)配制液體時注意配伍禁忌，使用雙頭輸液器輸液時嚴(yán)禁一個通道兩組液體同時開放;(3)準(zhǔn)確計(jì)算藥物劑量，特殊用藥(如地西泮、氨茶堿等)需雙人核算，＜1mL的藥量，須用1mL注射器抽吸;(4)根據(jù)患兒年齡、藥物性質(zhì)、病情合理安排輸液順序及調(diào)整輸液速度，對需要嚴(yán)格控制滴速的藥物使用微量泵或輸液泵;(5)勤巡視病房，嚴(yán)密觀察用藥過程中患兒病情變化，注意有無液體滲漏，輸注完畢及時更換;(6)做藥物過敏試驗(yàn)前要認(rèn)真評估患兒有無過敏史，如有過敏史者嚴(yán)禁做皮試。
3.2.3加強(qiáng)護(hù)士職業(yè)素質(zhì)管理(1)護(hù)士正確認(rèn)識安全護(hù)理的重要性和樹立較強(qiáng)的法制觀念是安全用藥的重要保障，故應(yīng)經(jīng)常組織護(hù)士學(xué)習(xí)相關(guān)法律知識，利用典型案例進(jìn)行教育，加強(qiáng)護(hù)士責(zé)任感和自我約束力，提高其慎獨(dú)精神與風(fēng)險(xiǎn)意識;(3)責(zé)任護(hù)士要充分了解分管患兒的病情、藥物治療方案，做好患兒家長用藥健康指導(dǎo)，讓患兒或其家長知曉所用藥品名稱及藥理作用，提高用藥依從性;(4)加強(qiáng)口服藥品管理，制定口服藥品發(fā)放流程，做到“看服到口”;(5)科室要加強(qiáng)護(hù)士藥學(xué)知識的培訓(xùn)和學(xué)習(xí)，兒科用藥復(fù)雜，護(hù)士應(yīng)拓寬自己的藥學(xué)知識，掌握兒科常用藥物的治療作用、不良反應(yīng)及注意事項(xiàng)，在使用新藥、特殊藥品前應(yīng)詳細(xì)閱讀藥品說明書。
3.2.4加強(qiáng)病區(qū)日常管理(1)護(hù)士長要加強(qiáng)病區(qū)管理，盡量保持環(huán)境安靜，倡導(dǎo)使用靜脈留置針，減輕護(hù)士工作強(qiáng)度和焦躁情緒;(2)每天做好“五查”，隨時檢查全病區(qū)護(hù)理質(zhì)量，重點(diǎn)關(guān)注新進(jìn)護(hù)士的工作情況;(3)中班、夜班、節(jié)假日要合理搭配值班人員，新老互補(bǔ)，實(shí)時監(jiān)管各班次用藥治療情況，及時發(fā)現(xiàn)安全隱患;(4)加強(qiáng)實(shí)習(xí)護(hù)士管理，要求帶教老師“放手不放眼”。
3.2.5加強(qiáng)藥品安全管理(1)科室設(shè)專人管理藥品，定期檢查藥品質(zhì)量，避免藥品積壓、過期，病房藥品每周清點(diǎn)一次，3個月內(nèi)要過期的藥品使用紅色筆記錄失效日期以示提醒;(2)藥品定位存放，入原裝盒、統(tǒng)一標(biāo)簽，合理制定藥品基數(shù)，嚴(yán)格按說明書要求存放;(3)遵循“先進(jìn)先出、近期先用”的原則，急救藥品使用完畢及時補(bǔ)充;(4)高危、毒、麻藥品專柜專鎖管理，應(yīng)有警示標(biāo)識。章飛雪等［8］建議使用合理用藥監(jiān)測系統(tǒng)(PASS)，對高危藥品醫(yī)囑進(jìn)行重點(diǎn)監(jiān)測和管理，確保用藥安全。
【關(guān)鍵詞】藥劑學(xué)管理；醫(yī)療差錯/預(yù)防和控制；護(hù)理工作/組織和管理
醫(yī)院病區(qū)藥品是醫(yī)院住院藥房的延伸，能為臨床一線儲備一定品種和數(shù)量常用急救藥品，為救治患者贏得時間。這些藥品普遍由各病區(qū)護(hù)理人員負(fù)責(zé)[1]。在護(hù)理差錯統(tǒng)計(jì)顯示，給藥錯誤，在護(hù)理差錯類別中居于首位。因此做好病區(qū)藥品管理，對于防范護(hù)理差錯起著重要的作用。
一、資料與方法
1.1一般資料我院是一所三級甲等醫(yī)院，共有23個護(hù)理單元，其中內(nèi)科病區(qū)10個，外科病區(qū)9個，門診系統(tǒng)科室4個。
將所有病區(qū)隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對照組，其中實(shí)驗(yàn)組共12個病區(qū)，對照組共11個病區(qū)，實(shí)驗(yàn)組和對照組病區(qū)的護(hù)士在年齡、職稱、性別及工作量上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。
1.2方法
1.2.1實(shí)驗(yàn)組
(1)規(guī)范放置，定期檢查。藥品按照類別分開放置，標(biāo)識清楚醒目；常用藥品放在易于取到之處；按名稱準(zhǔn)確放置到位，不裸放；取藥時從最上面藥盒的右側(cè)取用；指定一責(zé)任心強(qiáng)的護(hù)士負(fù)責(zé)藥品的質(zhì)量、有效期、是否規(guī)范放置(如冷藏、避光等)，每天小檢查，每月大檢查；護(hù)士長不定期抽查。
(2)學(xué)習(xí)掌握新特藥的用法。請藥師對新特藥品以講座、藥訊、宣傳欄或等多種方式傳授藥學(xué)知識。護(hù)士在使用時，先學(xué)習(xí)說明書，掌握了藥品正確用法后，再應(yīng)用于患者。護(hù)士長將新藥使用說明書裝訂成冊，供護(hù)士隨時翻閱。
(3)高危藥品標(biāo)示醒目，分開放置，有黑色警示標(biāo)志。
(4)改變病區(qū)藥品供應(yīng)方式，將“要多少供多少”的方式轉(zhuǎn)變?yōu)椤跋亩嗌傺a(bǔ)多少”的方式。
(5)“五?！被芾矶韭樗幤?。對于毒麻藥品實(shí)行專人、專鎖、專柜、專放、專用，班班交接。
1.2.2對照組按照常規(guī)病區(qū)藥品管理進(jìn)行，不進(jìn)行干預(yù)。
1.2.3觀察指標(biāo)分別收集2008-04-2009-04試驗(yàn)組和對照組用藥及其他原因?qū)е碌淖o(hù)理差錯的起數(shù)。
1.2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理使用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件包建立數(shù)據(jù)庫，采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
二、結(jié)果
兩組用藥所致的護(hù)理差錯情況比較：對照組32起，其中用藥所致的護(hù)理差錯14起，其他護(hù)理差錯18起，發(fā)生率43.8%；實(shí)驗(yàn)組16起，其中用藥所致的護(hù)理差錯1起，其他護(hù)理差錯15起，發(fā)生率6.3%。兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.345，P<0.05)。
三、討論
3.1擺放混亂，不易識別目前由于臨床用藥較為廣泛，品種繁多，尤其是綜合性科室，需要準(zhǔn)備多個器官系統(tǒng)的多種藥品，才能滿足臨床需要。每個綜合內(nèi)科病區(qū)一般都備有百余種藥品，一些藥品從藥房領(lǐng)回病區(qū)，多種零散藥品混雜在一起，使得藥品的名稱、劑量、有效期磨擦不清。在搶救患者時，外形相似的藥品，由于分辨不清，不僅易造成護(hù)理差錯，還會延誤時間，甚至延誤患者生命。所以規(guī)范、科學(xué)地管理病區(qū)藥品對于安全用藥起著至關(guān)重要的作用。病區(qū)藥品做到標(biāo)示清楚、定點(diǎn)放置、不裸擺、定期檢查、易于拿取。經(jīng)過一年的規(guī)范管理，實(shí)驗(yàn)組的護(hù)士不僅減少了護(hù)理差錯，還提高了工作效率。
3.2高危藥品沒有顯著標(biāo)識高度危險(xiǎn)性藥品是指10%氯化鉀溶液、10%氯化鈉溶液、胰島素注射液、化療藥品及其他能對患者一次性致死的藥品。這些藥品和其他普通藥品混放在一起，如果護(hù)士使用時不慎出現(xiàn)錯誤，會對患者造成嚴(yán)重的后果。實(shí)驗(yàn)組將高危藥品和普通藥品分開放置，并有明顯的警示標(biāo)志，如黑色骷髏標(biāo)識。這樣就會提醒護(hù)士在取用時倍加小心，多次查對，從而保證使用高度危險(xiǎn)性藥品的安全性，同時保證了護(hù)理安全。
3.3積壓藥品過期有些患者用藥時，只需取單包裝藥量中的一部分，這就使某一整包裝藥品可同時配與多個患者使用，從而節(jié)約一部分藥品。另外，醫(yī)生臨時更改醫(yī)囑或患者漏、拒用藥時也會導(dǎo)致藥品的積壓，時間久了，藥品就會過期。新修改的《中華人民共和國藥品管理法》中明確規(guī)定“超過有效期的藥品，未注明有效期的藥品或更改有效期的都按劣藥論處”，這些藥品是不能應(yīng)用于臨床的。實(shí)驗(yàn)組將“要多少供多少”的方式轉(zhuǎn)變?yōu)椤跋亩嗌傺a(bǔ)多少”的藥房供應(yīng)模式，從根本上改變了病區(qū)的藥品積壓過期現(xiàn)象，改變了過去定期銷毀過期藥品的方式，大大減少了藥品資源的浪費(fèi)。同時病區(qū)積壓藥品的減少，也減輕了護(hù)士的清領(lǐng)與整理，減輕了工作量，為治療室減輕了空間，也為患者節(jié)約了開支。
3.4新特藥品知識相對匱乏由于臨床藥學(xué)的發(fā)展，各種新特藥廣泛應(yīng)用于臨床，新特藥的使用注意事項(xiàng)如沒有及時對相關(guān)護(hù)士進(jìn)行培訓(xùn)，護(hù)理人員藥品知識相對匱乏，在使用時不了解其注意事項(xiàng)及配伍禁忌，不但新特藥品不能發(fā)揮相應(yīng)療效，甚至?xí)黾硬涣挤磻?yīng)。實(shí)驗(yàn)組通過多種渠道學(xué)習(xí)掌握特新藥的用法，這樣就能彌補(bǔ)新特藥的臨床經(jīng)驗(yàn)不足的缺陷，保證新特藥的療效與安全。
3.5“五?；惫芾矶韭樗幤凡^(qū)的毒麻藥品管理一般由護(hù)理人員負(fù)責(zé)，毒麻藥品的安全也是藥品安全的重要組成部分。
在新的形勢下，加強(qiáng)護(hù)理人員高度警惕意識，實(shí)行“五?；惫芾恚瑢Ｈ?、專鎖、專柜、專放、專用，班班交接，認(rèn)真負(fù)責(zé)，保障毒麻藥品的安全。
【參考文獻(xiàn)】
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1臨床資料
腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤8例，膀胱嗜鉻細(xì)胞瘤24例；男4例，女28例；年齡22～52歲，平均年齡38.2歲，均進(jìn)行嗜鉻細(xì)胞瘤手術(shù)切除，本組除1例患者術(shù)后出現(xiàn)中心靜脈壓（CVP）偏低，給予補(bǔ)液和應(yīng)用血管活性藥物，12小時后恢復(fù)正常外，其余患者均無異常反應(yīng)。
2術(shù)前用藥護(hù)理對策
2.1降壓藥物
嗜鉻細(xì)胞瘤分泌過量兒茶酚胺，使外周血管處于收縮狀態(tài)，血容量減少，而導(dǎo)致高血壓。腫瘤切除后，兒茶酚胺驟然減少，血管容量相對增大，回心血量及血輸出量減少，極易發(fā)生難以控制的低血壓，嚴(yán)重威脅患者的生命安全，因此術(shù)前降壓尤為重要。臨床上常用降壓藥有α-受體阻滯劑類藥物如：酚芐明、酚妥拉明、哌唑嗪等?；颊叻么祟愃幬锖?，護(hù)士應(yīng)密切觀察，每日早晚測血壓、脈搏2次，并注意及末梢循環(huán)變化。同時，應(yīng)向患者說明此類藥物的副作用，囑病人服藥期間不要隨意走動，改變時動作盡量緩慢，以防引起性低血壓，而發(fā)生意外。本組無病人因性低血壓造成傷害。該藥還具有鼻粘膜充血的作用，病人會產(chǎn)生鼻塞感，護(hù)理時注意與感冒相區(qū)別。因膀胱嗜鉻細(xì)胞瘤患者排尿時膀胱收縮，刺激腫瘤釋放大量的腎上腺素和去甲上腺素，使血壓突然升高，所以，對膀胱嗜鉻細(xì)胞瘤患者要監(jiān)測其排尿前后血壓的變化情況，以指導(dǎo)臨床用藥。
2.2擴(kuò)容藥物
由于長期的兒茶酚胺過量分泌使外周血管收縮，血容量減少，有效循環(huán)血量減少，必要的擴(kuò)充血容量是為了防止腫瘤切除后，血管床放開，血容量不足造成有效循環(huán)量減少的矛盾，同時，術(shù)前擴(kuò)容還有利于防止術(shù)中術(shù)后血壓突降，以及預(yù)防術(shù)中因血容量不足而大量快速擴(kuò)容可能造成的心力衰竭和肺水腫。臨床擴(kuò)容，多采用術(shù)前3天靜脈輸全血或血漿代用品，中分子或低分子右旋糖酐、平衡液，生理鹽水或5%葡萄糖。補(bǔ)液時應(yīng)注意液體的滴速控制，防止液體滴入過快引起心衰的發(fā)生。每日補(bǔ)液量控制在2000ml左右。
2.3糾正心律失常藥物
患者長期受兒茶酚胺的作用，使心血管系統(tǒng)耗損很重，常合并心律失常，病人心律加快，心動過速，甚至心房顫動，術(shù)前應(yīng)及時糾正心律失常，改善心功能。臨床常用藥物為心得安等α-受體阻滯劑。在使用α-受體阻滯劑時護(hù)士應(yīng)嚴(yán)密觀察脈搏、心率，當(dāng)心率＞100次/分時，可給予心得安10mg，3次/d，或氨酰心安25mg，2次/d，將心率控制于70～80次/分，在使用β-受體阻滯劑前，應(yīng)先用α-受體阻滯劑，否則阻斷β-受體的作用可引起α-腎上腺素能受體的興奮而使血壓進(jìn)一步升高，甚至發(fā)生肺水腫。若心律低于90次/min，則無需用心得安。嚴(yán)重的心律不齊者應(yīng)及時給予心電監(jiān)護(hù)。
2.4鎮(zhèn)靜藥物
嗜鉻細(xì)胞瘤患者可能出現(xiàn)高血壓危象而出現(xiàn)神志恍惚、躁動、抽搐等，此類病人須給予鎮(zhèn)靜、解痙等藥物治療。臨床常用鎮(zhèn)靜藥物為安定、苯巴比妥類、水合氯醛類等。因巴比妥類安全性較差，易致中毒，反復(fù)使用時還可成癮，故應(yīng)用此類藥物必須嚴(yán)格控制使用時間及劑量。同時應(yīng)注意苯巴比妥、水合氯醛等常用鎮(zhèn)靜藥物的不良反應(yīng)，加強(qiáng)保護(hù)措施，防止病人發(fā)生意外損傷，并注意監(jiān)測病人的血壓、心率，觀察患者意識。我院常規(guī)使用小劑量安定口服或肌注。術(shù)前日晚應(yīng)常規(guī)給予安定藥物鎮(zhèn)靜，防止由于緊張影響睡眠效果，導(dǎo)致血壓升高影響次日手術(shù)。本組28例患者入院后主訴煩躁、無法入睡，遵醫(yī)囑給予安定臨睡前口服或肌注效果良好。
3術(shù)后用藥護(hù)理對策
3.1血管活性藥物
由于嗜鉻細(xì)胞瘤切除后血液中腎上腺素和去甲腎上腺素驟減，血管容量相對增大，回心血量和心輸出血下降，容易導(dǎo)致血壓下降，甚至休克。臨床可通過血管活性藥物調(diào)整血壓。應(yīng)用血管活性藥物調(diào)整血壓時，應(yīng)根據(jù)病情，調(diào)整其用量、配制濃度及給藥速度，使藥物均勻輸入。用微量注射泵靜脈注射去甲腎上腺素時，可使血壓維持在術(shù)前無癥狀時最低血壓值或術(shù)前收縮壓的2/3。若血壓過高，可在硝普鈉嚴(yán)格調(diào)節(jié)下維持理想血壓。輸入血管調(diào)節(jié)藥物時應(yīng)注意觀察穿刺部位，防止?jié)B出引起局部組織缺血壞死。
嚴(yán)格無菌操作原則，遵循現(xiàn)用現(xiàn)配原則，選用經(jīng)驗(yàn)豐富、責(zé)任心強(qiáng)的護(hù)士進(jìn)行配藥，一人擺藥，一人核對配藥，保證每個環(huán)節(jié)雙人核對。注意配伍禁忌，選擇合適的溶媒及合適的輸液器。加強(qiáng)病區(qū)小藥柜及高危藥品的管理，嚴(yán)格要求高危藥品分類存放、專柜放置，與普通備用藥品分開。搶救藥品放在搶救車內(nèi)，有低溫儲存要求放置在冰箱制定欄。毒、麻藥品做到安全使用，專人管理并加鎖，保持固定支數(shù)，每班交接并登記。做好高危藥品警示標(biāo)示管理。質(zhì)控組成員每周檢查一次，并進(jìn)行記錄，科室每月檢查，發(fā)現(xiàn)問題及時糾正。明確規(guī)定過期、變質(zhì)、標(biāo)簽丟失或不清、科室暫時不需備存應(yīng)及時返回藥房。
2認(rèn)真觀察患者用藥后反應(yīng)
及時巡視，要求靜脈用藥過程中每1~2h巡視1次，觀察患者輸液部位、滴速是否與病情要求相符?；颊哂盟幒蟛涣挤磻?yīng)，填寫輸液巡視卡，每一瓶液體要核對，執(zhí)行者需在巡視卡上記錄時間和簽名，尤其要對重點(diǎn)患者如：有過敏史、高齡、心肺功能不全的患者重點(diǎn)巡視觀察，也要對重點(diǎn)藥物如：新進(jìn)首用藥物、易過敏藥物以及高危藥品（硝酸甘油、胰島素、氯化鉀）靜脈滴注要加以特別關(guān)注。
3提高護(hù)理人員藥學(xué)知識
安全用藥的前提是提高護(hù)理人員的藥學(xué)知識。組織護(hù)士積極參加市局及院組織的用藥安全講座，并且每周科內(nèi)學(xué)習(xí)護(hù)理安全核心制度及常用藥物、搶救藥物的藥理作用、給藥方法、安全劑量、配伍及臨床使用藥物的觀察及護(hù)理要點(diǎn)學(xué)習(xí)。加強(qiáng)與醫(yī)師及臨床藥師溝通，進(jìn)行專科藥物應(yīng)用的學(xué)習(xí)交流，利用晨會、科會提問與考核要求人人掌握內(nèi)容。每月科室組織臨床用藥使用規(guī)范流程的操作和聯(lián)合用藥知識考核，特別對重點(diǎn)護(hù)理人員（新護(hù)士、實(shí)習(xí)護(hù)士）加強(qiáng)培訓(xùn)，提高護(hù)理人員藥學(xué)知識。
4觀察項(xiàng)目
2013年1月開展前饋控制活動，2013年12月結(jié)束。前饋控制活動前后，對護(hù)士掌握藥學(xué)知識理論考試成績（100分制）、身份識別操作評分及病區(qū)藥品管理評分（標(biāo)準(zhǔn)評分表護(hù)理部考核、10分制）、年用藥安全缺陷率、住院患者服務(wù)體驗(yàn)滿意度（問卷調(diào)查）進(jìn)行觀察比較。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用PEMS3．1統(tǒng)計(jì)軟件統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料用x±s表示，樣本均數(shù)比較應(yīng)用配對t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（％）表示，各組之間的比較行χ2檢驗(yàn)；以P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
5結(jié)果
前饋控制活動前后年用藥安全缺陷率比較：2012年科室護(hù)理缺陷發(fā)生46例次，用藥安全缺陷28例次（61％）；2013年科室護(hù)理缺陷發(fā)生30例次，用藥安全缺陷9例次（30％），兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝5．74，P＜0．05）。住院患者服務(wù)體驗(yàn)滿意度（問卷調(diào)查）及護(hù)士用藥方面問題調(diào)查情況：2012年住院患者發(fā)放問卷112張，收回112張，基本滿意、滿意85例（76％），涉及護(hù)士用藥方面問題24例次（21％）；2013年住院患者發(fā)放問卷122張，收回122張，基本滿意、滿意113例（93％），涉及護(hù)士用藥方面問題11例次（9％），患者服務(wù)體驗(yàn)滿意度調(diào)查比較，涉及護(hù)士用藥方面問題調(diào)查，兩者比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05），住院患者服務(wù)體驗(yàn)滿意度提高，護(hù)士用藥方面問題明顯下降。
6討論
綜合職業(yè)能力是指學(xué)生需要在具體的工作環(huán)境中，對于實(shí)際問題具有足夠?qū)I(yè)的解決能力，這也是從事某一項(xiàng)職業(yè)所必須具備的能力。在現(xiàn)代社會激烈的競爭當(dāng)中，綜合職業(yè)能力是學(xué)生開展職業(yè)活動，參與社會生產(chǎn)所必須具備的重要條件。從整體層面來說，綜合職業(yè)能力應(yīng)該包括對問題解決分析的能力，信息處理和接收的能力、基本職業(yè)業(yè)務(wù)能力、管理能力、學(xué)習(xí)能力以及人際交往能力等多方面的能力。對于護(hù)用藥理學(xué)來說，其學(xué)科是當(dāng)代醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)理論與臨床課程的重要紐帶，其主要的研究對象是藥物與機(jī)體之間的作用規(guī)律和機(jī)制。護(hù)用藥理學(xué)的基礎(chǔ)知識理論的學(xué)習(xí)，主要是以提高學(xué)生臨床護(hù)理能力為根本目的，并且實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)具有基本知識和技能的高級護(hù)理人才。在綜合職業(yè)能力導(dǎo)向下，學(xué)生在參與護(hù)用藥理學(xué)學(xué)習(xí)的過程中，要掌握足夠的專業(yè)知識和職業(yè)技能，并且掌握終身學(xué)習(xí)的能力。在護(hù)用藥理學(xué)教學(xué)的過程中，學(xué)生要對于藥理學(xué)中的藥物作用、不良反應(yīng)、臨床用途以及用藥知識等相關(guān)問題進(jìn)行學(xué)習(xí)，并且為后續(xù)提供用藥咨詢與遺囑執(zhí)行提供良好的基礎(chǔ)，逐漸培養(yǎng)學(xué)生參與臨床課程學(xué)習(xí)的能力。對于職業(yè)院校的學(xué)生來說，綜合職業(yè)能力主要包括了專業(yè)內(nèi)外兩方面的能力。專業(yè)能力主要針對于學(xué)生的知識掌握水平和業(yè)務(wù)技能素質(zhì)來定義，而非專業(yè)能力主要是指學(xué)生的學(xué)習(xí)能力和社會能力等非業(yè)務(wù)知識類能力。在以往傳統(tǒng)的護(hù)用藥理學(xué)課堂教學(xué)中，大多數(shù)對于學(xué)生素質(zhì)能力方面的培養(yǎng)都存在著較多的欠缺。一般的傳統(tǒng)教學(xué)中，教師僅僅使用幻燈片，先回顧舊課，一般是病例導(dǎo)入新課，開始授課，最后總結(jié)這節(jié)課的重點(diǎn)和難點(diǎn)。這種枯燥的教學(xué)方式，雖然對于學(xué)生的專業(yè)能力進(jìn)行了有效的培養(yǎng)，但是忽視了對學(xué)生非專業(yè)能力的培養(yǎng)，沒有達(dá)到培養(yǎng)學(xué)生綜合職業(yè)能力的目標(biāo)。對于學(xué)生能力的培養(yǎng)上，教師要提高自身的認(rèn)識，并且重視對學(xué)生業(yè)務(wù)知識以外的社會能力和發(fā)展能力的培養(yǎng)。另外，綜合職業(yè)能力的培養(yǎng)，也要關(guān)注學(xué)生職業(yè)道德的成長，在教學(xué)的過程中重視培養(yǎng)學(xué)生正確的價(jià)值觀和人生觀，讓學(xué)生熱愛從事的工作。
2護(hù)用藥理學(xué)課程改革策略
2.1課程設(shè)計(jì)改革
第一，對于課程教學(xué)目標(biāo)進(jìn)行確定。在開展護(hù)用藥理學(xué)教學(xué)的過程中，要制定合理的教學(xué)目標(biāo)，并且合理地融合理論和實(shí)踐，在逐漸完成課堂任務(wù)的過程中，保證學(xué)生的技能和知識的有效掌握。總的來說，對于以往的教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行改變，對以往教學(xué)中教師教學(xué)模式進(jìn)行改變，實(shí)現(xiàn)教師引導(dǎo)的教學(xué)模式。通過合理地設(shè)定教學(xué)目標(biāo)，讓學(xué)生直接參與到課堂教學(xué)中。新的教學(xué)目標(biāo)的制定，要將培養(yǎng)職業(yè)能力作為教學(xué)的重點(diǎn)內(nèi)容，并且在本專業(yè)的基礎(chǔ)上，讓課堂教學(xué)目標(biāo)與實(shí)際社會生產(chǎn)的需求相一致，并且體現(xiàn)出對學(xué)生專業(yè)能力、社會能力等不同方面能力的培養(yǎng)的需求。在護(hù)理專業(yè)中，護(hù)用藥理是基礎(chǔ)課程，教學(xué)目標(biāo)的制定上，要與護(hù)士崗位的具體需求相一致。學(xué)生要在學(xué)習(xí)的過程中，主動地對臨床問題進(jìn)行解決，獲得良好的知識運(yùn)用能力。在教學(xué)中，要培養(yǎng)學(xué)生良好的職業(yè)道德精神，并且對學(xué)生的觀察分析與判斷的能力進(jìn)行不斷的鍛煉和培養(yǎng)，并且結(jié)合護(hù)士崗位從業(yè)的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，構(gòu)建完善的知識體系，讓學(xué)生的綜合職業(yè)能力得到有效的發(fā)展和提高。第二，對于課堂實(shí)踐內(nèi)容的合理選擇。在教學(xué)工作中，教師可以采取不同的教學(xué)手段，圍繞實(shí)際的教學(xué)內(nèi)容來針對性地開展不同教學(xué)形式。教學(xué)中，教師可以制定一個完整的工作項(xiàng)目，并且將工作項(xiàng)目與實(shí)際崗位的工作需求相結(jié)合，讓學(xué)生在具體的單位時間內(nèi)，對于某一工作任務(wù)進(jìn)行完成。在工作任務(wù)的選擇上，要盡可能地采用具有代表性、典型性、展示性、可操作性以及實(shí)戰(zhàn)性特點(diǎn)的工作任務(wù)。課堂實(shí)踐內(nèi)容要結(jié)合“護(hù)理專業(yè)工作任務(wù)與職業(yè)能力分析表”中的不同能力類型，提高實(shí)踐內(nèi)容的制定的有效性。在臨床的工作中，護(hù)理人員的責(zé)任重大，其需要對藥物治療過程進(jìn)行執(zhí)行，并且要監(jiān)護(hù)用藥的過程，給予相應(yīng)的用藥咨詢服務(wù)。在課程教學(xué)中，教師可以對臨床實(shí)踐工作流程中的幾大系統(tǒng)用藥特點(diǎn)來確定不同的教學(xué)實(shí)際訓(xùn)練項(xiàng)目。項(xiàng)目具體可以包括：中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、外周神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心血管系統(tǒng)疾病、內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病、內(nèi)臟系統(tǒng)疾病以及化學(xué)治療等幾方面的用藥教學(xué)，讓學(xué)生掌握更多的實(shí)際用藥護(hù)理的能力。第三，課堂教學(xué)過程的安排。教師要在課堂教學(xué)的過程中，對于課堂教學(xué)節(jié)奏進(jìn)行科學(xué)的把握，并且結(jié)合不同課時安排和課堂教學(xué)內(nèi)容，對于教學(xué)過程進(jìn)行分解。不同的教學(xué)單元中，課程知識內(nèi)容的難度都有所不同，教師要合理安排不同學(xué)時，并且結(jié)合本校教學(xué)安排需求，規(guī)定相應(yīng)的教學(xué)時間。一般來說，護(hù)用藥理學(xué)教學(xué)的整體安排可以在80學(xué)時內(nèi)來完成，并且考慮到實(shí)際教學(xué)效果的需求，要盡可能地將最短教學(xué)時間設(shè)定為2學(xué)時。在進(jìn)行教案設(shè)計(jì)的過程中，教師要對整個結(jié)構(gòu)進(jìn)行把握，并且逐一細(xì)化不同課時教學(xué)安排，對于課堂教學(xué)內(nèi)容和教學(xué)目標(biāo)進(jìn)行有效的體現(xiàn)。新課程改革中，這種實(shí)踐性較強(qiáng)的教學(xué)模式，規(guī)定了學(xué)生的主體性學(xué)習(xí)地位。教師要對于教學(xué)中學(xué)生的活動時間給予充分的保障，并且給予學(xué)生足夠的探索機(jī)會。在教學(xué)過程中，教師完成任務(wù)的分配和布置之后，讓學(xué)生主動地在課外時間查找相關(guān)資料，在課上進(jìn)行自主討論和匯報(bào)，教師再對學(xué)生的匯報(bào)過程進(jìn)行指導(dǎo)與點(diǎn)評，讓學(xué)生在修改的過程中，實(shí)現(xiàn)知識掌握程度的加深。
2.2課程實(shí)施改革
首先，課堂的教學(xué)準(zhǔn)備。在開展課堂教學(xué)工作中，教師要做好充分的準(zhǔn)備，并且對傳統(tǒng)教學(xué)模式中，教師的主導(dǎo)地位進(jìn)行淡化和改變，教師要重新定位自身的角色，以引導(dǎo)者的身份來參與到課堂教學(xué)過程中。教師要為學(xué)生設(shè)計(jì)合理的教學(xué)環(huán)節(jié)，并且充分地做好備課工作，對于具體教學(xué)訓(xùn)練項(xiàng)目來采取合理的教學(xué)設(shè)計(jì)手段，做好相關(guān)的準(zhǔn)備工作。其次，課堂教學(xué)中教學(xué)工作的開展。要想培養(yǎng)學(xué)生的職業(yè)能力，采取實(shí)踐性較強(qiáng)的訓(xùn)練化教學(xué)手段是非常必要的。在開展課堂教學(xué)工作的過程中，教師可以采用任務(wù)驅(qū)動法來進(jìn)行教學(xué)。例如，教師可以結(jié)合臨床的具體工作流程，來安排學(xué)生進(jìn)行參與練習(xí)，包括用藥醫(yī)囑、臨床案例處理等。另外，教師也可以采用翻轉(zhuǎn)課堂的教學(xué)方法，讓學(xué)生課下預(yù)習(xí)，上課來進(jìn)行講解，對于一些不理解的內(nèi)容再提問，從而提高學(xué)生的積極性活躍課堂氣氛。另外，教師還要培養(yǎng)學(xué)生良好的基礎(chǔ)知識運(yùn)用能力和引伸能力，對課堂教學(xué)中的內(nèi)容進(jìn)行拓展，保持合理的教學(xué)節(jié)奏。最后，教學(xué)收尾工作。在教學(xué)開展過程中，教師可以對學(xué)生下發(fā)相應(yīng)任務(wù)和提問，讓學(xué)生自主地對問題進(jìn)行解答，進(jìn)行信息的搜集和合作解決。教學(xué)過程中，教師可以采用小組化的教學(xué)方式，讓學(xué)生以小組為單位來進(jìn)行實(shí)際操作的模擬，并且共同對學(xué)習(xí)內(nèi)容進(jìn)行匯報(bào)。在匯報(bào)的過程中，教師也可以采取點(diǎn)評與模擬的方式，對于具體的模擬用藥、不良反應(yīng)處理以及醫(yī)囑等解答內(nèi)容進(jìn)行教學(xué)。通過對學(xué)生匯報(bào)的過程進(jìn)行耐心的聽取和記錄，在學(xué)生完成報(bào)告之后對學(xué)生存在的不足指出相應(yīng)的意見，并且具體動手來對學(xué)生進(jìn)度操作的示范，對課堂教學(xué)過程進(jìn)行有效的補(bǔ)充。
2.3課程考核改革
在當(dāng)前教學(xué)過程中，以往傳統(tǒng)的教學(xué)評價(jià)方式，不利于對學(xué)生綜合職業(yè)能力的培養(yǎng)，并且不適應(yīng)當(dāng)代素質(zhì)教育的基本需求。在開展教學(xué)考核的過程中，要結(jié)合教學(xué)過程來開展過程化、全面的教學(xué)考核工作，提高課程考核的合理性，真實(shí)地對學(xué)生的學(xué)習(xí)效果和綜合能力進(jìn)行反映。在考核的過程中，教師要執(zhí)行多層次化的考核模式，并且針對于不同水平的學(xué)生，采取不同的考核方式。與此同時，教師還可以引入自評的方式，讓學(xué)生自行地進(jìn)行自我評價(jià)。教師在學(xué)生自評的過程中，對學(xué)生的自評過程進(jìn)行監(jiān)督。在考核體系的改革中，教師要對于學(xué)生與綜合職業(yè)能力成長相關(guān)的實(shí)際操作能力、基礎(chǔ)知識掌握能力以及學(xué)習(xí)能力和團(tuán)隊(duì)合作能力等方面進(jìn)行考核。根據(jù)考核和評價(jià)結(jié)果，教師對于后續(xù)教學(xué)過程進(jìn)行合理的調(diào)整與改進(jìn)創(chuàng)新，從而促進(jìn)學(xué)生更好地成長和發(fā)展。
3結(jié)束語
【摘要】子午流注法是中醫(yī)學(xué)的一大瑰寶。早在兩千多年前的《黃帝內(nèi)經(jīng)》中就提出了“人與天地相參，與日月相應(yīng)”的天人相應(yīng)的觀點(diǎn)，認(rèn)為“夫百病者多以旦慧、晝安、夕加、夜甚”的規(guī)律，并在此基礎(chǔ)上提出了人的活動須順時應(yīng)勢，以達(dá)到“陰平陽秘”的防病治病原則和“因天時而調(diào)氣血”的因時調(diào)攝方法。在長期實(shí)踐中，創(chuàng)立了時間病理學(xué)、時間治療學(xué)和“春夏養(yǎng)陽，秋冬養(yǎng)陰”及幫助人“固本扶元”的時間養(yǎng)生學(xué)，所有這些揭示了時間規(guī)律的變化對人體生理、病理的影響和利用自然規(guī)律提高醫(yī)療效果的方法。我們現(xiàn)將應(yīng)用子午流注理論指導(dǎo)擇時服藥的護(hù)理介紹如下。
一、子午流注的定義
現(xiàn)代時間生物學(xué)證明，人體生命現(xiàn)象、生理活動都具有相對穩(wěn)定的時間節(jié)律性，包括季節(jié)、晝夜等節(jié)律。有人稱此為“生物鐘”，反映出人與自然的密切聯(lián)系。在源遠(yuǎn)流長的中醫(yī)治療臨床實(shí)踐活動中，子午流注的學(xué)術(shù)理論伴隨著它獨(dú)特的臨床療效而被肯定并流傳下來。
“子午”是十二地支中的第1數(shù)和第7數(shù)(十二地支：子、丑、寅、卯、辰、巳、午、未、申、酉、戌、亥)，在這里指時間。就1日而言，子為夜半，午為日中；就1年而言，子為冬至氣在月(農(nóng)歷十一月)，午為夏至血在月(農(nóng)歷五月)；就氣候而言，子時寒，午時熱。由此可見，子午還含有陽極生陰、陰極生陽的意義，說明子午是陰陽轉(zhuǎn)化的起點(diǎn)和界限。
“流注”是將人體氣血循環(huán)比做水流，表示脈氣注輸過程。
子午流注，簡單的說，是以子午言時間，以流注喻氣血，子午流注就是指人體的氣血循環(huán)，從子時到午時或從午時到子時，陰陽各經(jīng)氣血的盛衰開闔都有固定的時間。氣血盈時而至為盛，過時而去為衰，逢時為開，過時為闔。氣血于寅時由肺經(jīng)流注，卯時流注大腸經(jīng)，依次為：辰時胃經(jīng)、巳時脾經(jīng)、午時心經(jīng)、未時小腸經(jīng)、申時膀胱經(jīng)、酉時腎經(jīng)、戌時心包經(jīng)、亥時三焦經(jīng)、子時膽經(jīng)、丑時肝經(jīng)，最后再流入肺經(jīng)，首尾相接，如環(huán)無端。氣血流注周而復(fù)始地流灌各臟腑。
二、應(yīng)用子午流注理論指導(dǎo)擇時服藥
根據(jù)子午流注的理論，借著氣血灌注，盛衰開闔的有利時機(jī)，因勢利導(dǎo)，協(xié)調(diào)陰陽，調(diào)和氣血。因此，服藥時首先對疾病進(jìn)行臟腑定位，然后區(qū)分病證之虛實(shí)，依時辰分別用藥施治：大凡實(shí)證，在其經(jīng)開之時，宜給藥瀉其有余之邪；虛證，在經(jīng)開后1個時辰給予補(bǔ)益之劑。臨床實(shí)踐證明，按時辰分臟腑經(jīng)絡(luò)服藥法確可提高療效。筆者依據(jù)子午流注二十四時歸屬理論，當(dāng)某經(jīng)脈臟腑得到氣血流注時，其功能則隨之旺盛的特點(diǎn)，對100例小兒病毒性心肌炎擇時服藥規(guī)律進(jìn)行了臨床研究，觀察中藥擇時內(nèi)服療法治療小兒病毒性心肌炎的療效。治療組擇時服藥為每日3次(8：00、13：00、20：00)；對照組常規(guī)服藥為每日2次(8：00、18：00)。結(jié)果：治療組總有效率為94.0%，優(yōu)于對照組80.0%(P<0.05)。選擇服藥的時辰在午時(13：00飯后服)正為氣血流注心經(jīng)之刻，心經(jīng)功能在旺盛狀態(tài)，有利于驅(qū)邪外出，并且心經(jīng)旺，有利于周身血液循環(huán)，心火生脾土有利于消化；在戌時(20：00睡前服)心包經(jīng)最旺?！靶陌鼮樾闹饽?，附有脈絡(luò)，氣血通行之道。邪不能容，容之心傷”。心包是心的保護(hù)組織，又是氣血通道，心包經(jīng)戌時興旺，可清除心臟周圍外邪，使心臟處于完好狀態(tài)，再次增加心的力量，心火生脾土有利于消化吸收；辰時(8：00飯后服)胃經(jīng)旺盛，有利于藥物的消化吸收。故在辰、午、戌時內(nèi)服中藥治療小兒病毒性心肌炎取得了滿意的療效。蔡仁英運(yùn)用子午流注服藥法對肺源性心臟病患者的服藥時間予以特定安排：上午服宣肺清肺化痰之劑，一次頓服，服藥時間為5：00～7：00；下午服補(bǔ)肺益腎納氣利水之劑，一次頓服，時間為17：00～19：00，經(jīng)與常規(guī)服藥(每日1劑，分2次煎服)對照組比較有效率明顯提高(P<0.05)。其他擇時服藥的護(hù)理臨床研究涉及病種還有上消化道潰瘍、子宮內(nèi)膜炎、腰椎間盤突出癥等，均顯示出以子午流注法擇時服藥在臨床中的重要作用。
綜上所述，掌握子午流注的規(guī)律，對指導(dǎo)臨床用藥是十分重要的。臨床實(shí)踐表明，藥物的藥性特點(diǎn)與人體生理活動的晝夜節(jié)律相同步，就能獲得藥半功倍的效果。
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關(guān)鍵詞：蘇木素胰蛋白酶熒光光譜紫外光譜酶活性
中藥蘇木的主要成分蘇木素(Haematorylin)是組織、病理實(shí)驗(yàn)室中最常用的染色劑，可用于細(xì)胞核染色［1］。蘇木素具有收縮血管、中樞抑制及抗炎等作用，具有行血、破淤、消腫、止痛的功效［2］。胰蛋白酶(trypsin)是人和動物腸道中一種重要的蛋白水解酶，從該酶被發(fā)現(xiàn)以來，人們對其進(jìn)行了一定的研究，如用胰蛋白酶為催化劑對蛋白質(zhì)進(jìn)行降解的研究［3～5］。藥物對胰蛋白酶作用的性質(zhì)［6］及蘇木素與DNA作用的性質(zhì)的研究已引起重視［7］。本文主要通過紫外和熒光光譜法研究蘇木素與胰蛋白酶作用的性質(zhì)，從而獲得蘇木素與胰蛋白酶作用時結(jié)構(gòu)變化、所處微環(huán)境等信息，探討蘇木素與胰蛋白酶相互作用的機(jī)制，并對蘇木素與胰蛋白酶作用活性的影響也進(jìn)行了研究。
1器材
1.1儀器熒光分光光度計(jì)，美國CaryEclipse（瓦里安）產(chǎn)品；雙光束紫外可見分光光度計(jì)TU－1901，北京普析產(chǎn)品；pH－3C型酸度計(jì)，上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品。
1.2藥品牛胰蛋白酶（生化試劑），上海海洋生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品；蘇木素（生物染色劑BS），成都科龍化工試劑廠產(chǎn)品；硼酸（分析純），成都科龍化工試劑廠產(chǎn)品。
2方法
2.1蘇木素對胰蛋白酶活性影響在恒溫水浴箱中將酪蛋白、胰蛋白酶和蘇木素預(yù)熱，按酶活性的測定方法，在胰蛋白酶與酪蛋白的酶解反應(yīng)體系中加入不同體積的蘇木素溶液，測定蘇木素對酶活性的影響。胰蛋白酶活性及抑制常數(shù)測定參照文獻(xiàn)［8］方法操作。
2.2蘇木素對胰蛋白酶紫外光譜的影響配制pH＝7.5的硼酸緩沖溶液（內(nèi)含0.1mol/LCaCl2維持離子強(qiáng)度）；用硼酸緩沖溶液配制1.0×10-4mol/L的胰蛋白酶溶液，再用3次蒸餾水分別配制2.0×10-3mol/L和1.0×10-3mol/L的蘇木素溶液。
室溫條件下，在1cm×1cm的石英比色皿中準(zhǔn)確加入1.0×10-4mol/L的胰蛋白酶溶液3.0ml，掃描190～350nm的吸收光譜。然后用微量注射往其中準(zhǔn)確加入1.0×10-3mol/L的蘇木素溶液10μl，混勻，靜置2min后掃描190～350nm的吸收光譜。掃描1.0×10-3mol/L蘇木素溶液190～350nm的吸收光譜。
2.3蘇木素對胰蛋白酶熒光光譜影響在1cm×1cm的石英比色皿中準(zhǔn)確加入1.0×10-4mol/L的胰蛋白酶溶液3.0ml，用微量注射器分別加入2.0×10-3mol/L的蘇木素溶液0，10，20，30，40，50，60，70μl。每次加入后混勻，放置5min，分別在20，25，30，35℃下，測定其熒光光譜，激發(fā)波長為280nm，繪制288～450nm的熒光光譜。
2.4蘇木素對胰蛋白酶作用的同步熒光將“2.3”項(xiàng)下所配的溫度為298K的溶液，固定激發(fā)和發(fā)射波長間隔λ分別為20nm和60nm，同時掃描激發(fā)和發(fā)射波長并記錄同步熒光光譜。
3結(jié)果
3.1蘇木素對胰蛋白酶活性的影響蘇木素對胰蛋白酶有抑制作用，當(dāng)蘇木素濃度為4.5×10-4mol/L時，蘇木素使胰蛋白酶的相對活性下降到70.2%，抑制率為29.8%。在不同的底物濃度（40，30，20，10g/L酪蛋白溶液）下，按酶活性的測定方法測定酶的反應(yīng)速度，其結(jié)果以1/v對抑制劑量用Dixon作圖法求出Ki=6.13×10-5mol/L，抑制類型為非競爭性抑制。
3.2蘇木素對胰蛋白酶紫外吸收光譜影響圖1為T＝298K，pH＝7.4時的吸收光譜。蛋白質(zhì)分子中的色氨酸，酪氨酸和苯丙氨酸殘基均有紫外吸收，蛋白質(zhì)的吸收波長一般在280nm附近。從圖1可以看出，當(dāng)往胰蛋白酶中加入蘇木素后，混合溶液在280nm附近的吸收峰均明顯增高，說明蘇木素與胰蛋白酶之間發(fā)生了作用，改變了胰蛋白酶的構(gòu)象,而這種作用有利于胰蛋白酶分子中色氨酸，酪氨酸和苯丙氨酸殘基的π－π*電子躍遷。
3.3熒光光譜以λex＝280nm，胰蛋白酶在354nm附近有很強(qiáng)的熒光峰；而以同樣激發(fā)波長激發(fā)蘇木素溶液，在354nm附近則沒有熒光峰，證明蘇木素不會產(chǎn)生與胰蛋白酶干擾的熒光。固定胰蛋白酶的量，隨著體系中蘇木素濃度的增加，胰蛋白酶的內(nèi)源熒光產(chǎn)生有規(guī)律的猝滅，其最大發(fā)射波長未發(fā)生明顯的變化（見圖2）。
3.4熒光猝滅常數(shù)及猝滅機(jī)理
3.4.1蘇木素對胰蛋白酶的猝滅效應(yīng)一般情況下，可依據(jù)不同溫度下的結(jié)果區(qū)別是動態(tài)猝滅，還是靜態(tài)猝滅。對于動態(tài)猝滅，隨著溫度升高，將增加離子有效碰撞的數(shù)目，加劇電子的轉(zhuǎn)移，使熒光物質(zhì)的猝滅常數(shù)隨溫度的升高而增大。而對于靜態(tài)猝滅則溫度升高將降低復(fù)合物的穩(wěn)定性，使猝滅常數(shù)減小。本文以相同的實(shí)驗(yàn)條件，分別測定了在20，25℃下胰蛋白酶的熒光猝滅光譜，以［F0/F－1］對［C］作Stern－Volmer圖見圖3。從圖3可以看出蘇木素在溫度低于25℃時猝滅常數(shù)隨溫度的升高而降低，即符合靜態(tài)猝滅機(jī)理。
當(dāng)猝滅體分子和熒光物質(zhì)分子之間形成新的復(fù)合物而發(fā)生靜態(tài)猝滅時，服從Lineweaver-Burk方程。20，25℃時以（F0－F）－1對［C］－1擬合Lineweaver-Burk方程，由圖4可見該雙倒數(shù)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，再次確定在20，25℃時為靜態(tài)猝滅。
3.4.2結(jié)合位點(diǎn)數(shù)n及結(jié)合常數(shù)KA的計(jì)算設(shè)蘇木素與胰蛋白酶形成n個結(jié)合點(diǎn)位的復(fù)合物則有：
Lg［（F0－F）/F］＝lgKA+nlg［C］
分別作不同溫度下Lg［（F0－F）/F］－lg［C］的雙對數(shù)擬合，得到不同溫度下的KA和n見表1。表1蘇木素與胰蛋白酶的結(jié)合常數(shù)，結(jié)合位點(diǎn)數(shù)及相應(yīng)的相關(guān)系數(shù)（略）
3.4.3作用力類型的確定猝滅體與生物大分子之間的相互作用力
主要有氫鍵、范德華力、靜電引力和疏水作用力。根據(jù)以下公式計(jì)算。結(jié)果見表2。表2蘇木素與胰蛋白酶作用的熱力學(xué)參數(shù)（略）
ln(K2/K1)=H(1/T1-1/T2)/R
G=-RTlnK
S=(H-G)/T
由上可知，H＜0和S＜0，可以說明蘇木素與胰蛋白酶之間的作用力主要表現(xiàn)為氫鍵和范德華力［9］。
3.4.4蘇木素對胰蛋白酶構(gòu)象的影響固定激發(fā)波長與發(fā)射波長的間距λ，掃描同步熒光光譜，這種光譜可用于蛋白質(zhì)構(gòu)象變化的分析,由(a)λ＝20nm所得到的同步熒光光譜圖僅顯示的是酪氨酸殘基的熒光，(b)λ＝60nm時僅表現(xiàn)出色氨酸殘基的熒光，由圖5可以看出在此實(shí)驗(yàn)條件下，酪氨酸和色氨酸殘基熒光同時被猝滅，使其熒光強(qiáng)度下降，酪氨酸殘基的最大發(fā)射波長沒有發(fā)生改變，但色氨酸殘基的最大發(fā)射波長發(fā)生了藍(lán)移，表明色氨酸基所處環(huán)境的疏水性增強(qiáng)，引起了胰蛋白酶的構(gòu)象變化。
4結(jié)論
蘇木素對胰蛋白酶活性可產(chǎn)生非競爭性抑制，抑制劑常數(shù)Ki=6.13×10-5mol/L；蘇木素對胰蛋白酶的熒光猝滅效應(yīng)為靜態(tài)猝滅，說明蘇木素能與胰蛋白酶形成復(fù)合物；蘇木素與胰蛋白酶之間的作用力主要表現(xiàn)為氫鍵和范德華力；蘇木素與胰蛋白酶可發(fā)生作用，改變了胰蛋白酶的構(gòu)象，而色氨酸所處環(huán)境的疏水性增強(qiáng)顯著。
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