序論：在您撰寫細(xì)胞增殖論文時，參考他人的優(yōu)秀作品可以開闊視野，小編為您整理的7篇范文，希望這些建議能夠激發(fā)您的創(chuàng)作熱情，引導(dǎo)您走向新的創(chuàng)作高度。

第1篇

論文摘要目的：探討糖尿病足中醫(yī)辨證分型與血管細(xì)胞核增殖相關(guān)抗原的表達(dá)差異。方法：對32例截肢的糖尿病足患者按中醫(yī)辨證分為氣血兩虛瘀阻證、脈絡(luò)瘀熱證、脈絡(luò)熱毒證和氣陰兩虛瘀阻證，分別對其截肢肢體的脛后動脈應(yīng)用免疫組化法對細(xì)胞核增殖相關(guān)抗原（Ki67）的表達(dá)進(jìn)行觀察、分析。結(jié)果：Ki67的陽性表達(dá)與糖尿病足動脈硬化閉塞程度呈負(fù)相關(guān)，與血管炎癥病變程度呈正相關(guān)。結(jié)論：炎癥在糖尿癥的大血管病變的過程中起到了重要的作用。

糠尿病足是糖尿病的嚴(yán)重并發(fā)癥，據(jù)統(tǒng)計1996年全球糖尿病患者1．2億，預(yù)計到2025年，將達(dá)到2．5億以上，而大約15％的糖尿病患者將在其生活的某一時間發(fā)生足潰瘍或壞疽[1]。目前對于糖尿病足病因及發(fā)病機制雖然還不是完全清楚，但大家公認(rèn)糖尿病合并大血管病變導(dǎo)致動脈粥樣硬化是糖尿病足發(fā)病的最主要因素?，F(xiàn)將2004年10月～2005年5月間我們收治的32例糖尿病足患者的截肢動脈標(biāo)本的血管細(xì)胞核增殖相關(guān)抗原(Ki67)與其中醫(yī)辨證分型的相關(guān)性研究情況報告如下。

1臨床資料

1．1一般資料：32例均為天津醫(yī)科大學(xué)代謝病醫(yī)院和天津中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院2004年10月～2005年5月間的住院患者，其中男性24例，女性8例；年齡50～86歲，平均年齡69．2歲；糖尿病病程最長30年，最短6年，平均18±2．4年。

1．2診斷標(biāo)準(zhǔn)：糖尿病足的診斷標(biāo)準(zhǔn)采用2000年中華醫(yī)學(xué)會糖尿病學(xué)會第二屆糖尿病足會議所制訂的“糖尿病足(肢端壞疽)檢查方法及診斷標(biāo)準(zhǔn)”。

1．3截肢標(biāo)準(zhǔn)：參照國際糖尿病足工作組編寫的《糖尿病足國際共識》中關(guān)于“大截肢的定義、標(biāo)準(zhǔn)和指標(biāo)”[2]執(zhí)行。

1．4中醫(yī)辨證分型標(biāo)準(zhǔn)：參照《中醫(yī)外科學(xué)(第七版)》及《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則·脫疽》之中醫(yī)辨證分型方案分為氣陰兩虛瘀阻證、脈絡(luò)瘀熱證、氣血兩虛瘀阻證、脈絡(luò)熱毒證四型。

2觀察方法

2．1標(biāo)本取材：壞疽截肢標(biāo)本32例，其中按中醫(yī)辨證分型氣血兩虛瘀阻組10例，脈絡(luò)瘀熱組10例，氣陰兩虛瘀阻組4例，脈絡(luò)熱毒組8例，取各例標(biāo)本下肢脛后動脈。標(biāo)本經(jīng)過10％福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，備用。

2．2設(shè)備、試劑：美國PENGUIN-600CL自動圖像分析系統(tǒng)，細(xì)胞核增殖相關(guān)抗原(Ki67)抗體PV9000試劑盒DAB購于北京中山生物技術(shù)有限公司。

2．3免疫組織化學(xué)法：標(biāo)本常規(guī)石蠟包埋，4μm連續(xù)切片，采用PV法進(jìn)行免疫組化染色，染色過程嚴(yán)格按試劑盒染色程序進(jìn)行，選取已知的陽性切片作陽性對照，PBS代替一抗作為陰性對照。觀察細(xì)胞核增殖相關(guān)抗原(Ki67)，陽性物質(zhì)呈棕黃色細(xì)顆粒狀于細(xì)胞核表達(dá)，采用美國PENGUIN-600CL圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行圖像分析，選取病變處每500個細(xì)胞Ki67的陽性表達(dá)率作為其陽性表達(dá)指數(shù)。統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用SPSS10．0軟件包進(jìn)行方差分析。

3結(jié)果

3．1中醫(yī)各證型所占比例以及年齡、性別分布：各證型比例，氣血兩虛瘀阻組10例（31．25%），脈絡(luò)瘀熱組10

例（31．25%），氣陰兩虛瘀阻組4例（12．5%），脈絡(luò)熱毒組8例（25．0%）。年齡、性別分布情況，見表1。

表132例患者年齡、性別分布n（%）

性別n50~60歲61~70歲71~80歲80歲以上男24（75．0）4（12．5）8（25．0）11（34．4）1（3．1）女8（25．0）1（3．1）3（9．3）4（12．5）0總計32（100．0）5（15．6）11（34．4）15（46．9）1（3．1）3．2免疫組織化學(xué)法觀察各證型Ki67表達(dá)差異：具體情況見表2。

表2各證型Ki67陽性表達(dá)指數(shù)比較（%）

證型Ki67陽性表達(dá)指數(shù)脈絡(luò)熱毒4．87±1．01*氣陰兩虛瘀阻1．86±0．47脈絡(luò)瘀熱1．49±0．13氣血兩虛瘀阻0．30±0．18注：與氣血兩虛瘀阻型比較，*P<0．05。

氣血兩虛瘀阻證、脈絡(luò)熱毒證、脈絡(luò)瘀熱證、氣陰兩虛瘀阻證中均可見部分細(xì)胞Ki67呈陽性表達(dá)，在脈絡(luò)熱毒證中表達(dá)指數(shù)最高，氣血兩虛瘀阻證中表達(dá)指數(shù)最低，二者比較具有顯著性差異(P<0．05)。

4討論

Ki67抗原為細(xì)胞核內(nèi)與細(xì)胞分裂增殖相關(guān)的蛋白抗原，分子量為345kd和395kd，其編碼基因位于第10號染色體上。Ki67的表達(dá)出現(xiàn)于G1中期到晚期，S期和G2期逐漸增加，有絲分裂期達(dá)高峰，分裂后迅速降解或丟失抗原決定簇，到G0期則不表達(dá)，半衰期為lh或更短[3]。有人認(rèn)為它可能是具有蛋白結(jié)合特性的重要結(jié)構(gòu)，在有絲分裂中起著維持DNA規(guī)則結(jié)構(gòu)的重要作用[4]，是一個反映細(xì)胞增殖的敏感指標(biāo)。

在糖尿病足的不同辨證分型中氣血兩虛瘀阻證、脈絡(luò)熱毒證、脈絡(luò)瘀熱證、氣陰兩虛瘀阻證中Ki67表達(dá)均呈陽性，在脈絡(luò)熱毒證中表達(dá)最強、氣血兩虛瘀阻證中表達(dá)最弱，二者相比具有顯著性差異(P＜0．05)。根據(jù)Ki67陽性指數(shù)可以判斷細(xì)胞增殖的活性，指明細(xì)胞增殖與糖尿病足動脈病變的關(guān)系。在糖尿病足的不同辨證分型中動脈的硬化閉塞程度由輕到重依次是脈絡(luò)熱毒證、氣陰兩虛瘀阻證、脈絡(luò)瘀熱證、氣血兩虛瘀阻證。Ki67的陽性表達(dá)與糖尿病足動脈硬化閉塞程度呈負(fù)相關(guān)。而在通過對32例糖尿病足截肢的動脈進(jìn)行病理學(xué)觀察的過程中發(fā)現(xiàn)糖尿病足血管病變主要體現(xiàn)在中動脈的病理學(xué)變化，其中脈絡(luò)熱毒、氣陰兩虛瘀阻兩證型以動脈周圍及全層的炎癥性改變?yōu)橹?；脈絡(luò)瘀熱、氣血兩虛瘀阻證以中膜鈣化、平滑肌細(xì)胞萎縮、變性、壞死及膠原纖維增多及內(nèi)膜粥樣斑塊形成為主，炎癥表現(xiàn)不明顯；而Ki67的陽性指數(shù)與血管炎癥病變程度呈正相關(guān)。這說明炎癥在糖尿病的大血管病變的過程中起了重要的作用，特別是在脈絡(luò)熱毒證、氣陰兩虛瘀阻證兩型，這對臨床具有重要的指導(dǎo)意義。

5參考文獻(xiàn)

1BoultonAJ.Thediabeticfoot：aglobalview.DiabetelMetabResRev，2000，16(1)：2．

2許樟榮，敬華．糖尿病足國際共識．中華糖尿病學(xué)會第二屆足病第一次足病研討會．2002，435．

第2篇

【關(guān)鍵詞】骨髓內(nèi)皮細(xì)胞GMCSF細(xì)胞增殖

EffectsofGranulocyteMacrophageColonyStimulatingFactoronGrowthofMurineBoneMarrowEndothelialCells

AbstractThepurposeofthisstudywastoinvestigatetheeffectsofgranulocytemacrophagecolonystimulatingfactor(GMCSF)onthegrowthofmousebonemarrowendothelialcells.Endothelialcellculturemedium（EndoM）wasusedtoculturemurinebonemarrowendothelialcells.EndothelialcellcolonieswerecountedundermicroscopebyWrightGiemsastaining.TheeffectofdifferentconcentriationofGMCSFontheproliferationofbonemarrowendothelialcellswasobservedbytheformationofendothelialcellcolonies,MTTandflowcytometry.TheresultsindicatedthattheendothelialspecificmarkervWFwasexpressedbythecolonycells,GMCSFpromotedtheproliferationofbonemarrowendothelialcellcoloniesandMTTconfirmedtheeffectofGMCSFonpromotingtheproliferationofbonemarrowendothelialcells.TheresultofdetectingcellcycleshowedthattherateofcellsenteringintoSphasewas9.3%inGMCSFaddedgroupandtherateofcellsenteringintoSphasewas2.1%incontrol.Therewasnosignificantdifferenceincellgrowthcurvebetweenthefirstpassageandfourthpassage.ItisconcludedthatGMCSFcanpromotetheproliferationofbonemarrowendothelialcells,theproliferationpotentialofbonemarrowendothelialcellsbetweenthefirstandfourthpassagenosignificantlychanges.

Keywordsbonemarrowendothelialcells;GMCSF;proliferation

JExpHematol2007;15(3):622-625

目前，已有許多報道證明內(nèi)皮細(xì)胞（endothelialcells,EC）、內(nèi)皮祖細(xì)胞（endothelialprogenitorcells,EPC）可以用來治療缺血性心臟病以及各種疾病引起的肢體缺血［1,2］也可以用于組織工程的血管構(gòu)建［3］，并取得了一定的成果。Kawamoto等［4］報道，EPC對缺血心臟病進(jìn)行治療具有良好的效果，一方面減少了缺血組織的面積，同時改善了心臟的功能。Kalka等［5］則報道了利用EPC對肢體缺血的小鼠模型進(jìn)行治療，實驗結(jié)果表明了EPC能顯著增加缺血肢體的灌流，而且組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)缺血部位毛細(xì)血管的數(shù)目也大大增加。內(nèi)皮細(xì)胞的來源有多種，可以從外周血、臍血及骨髓中獲得［6］，而外周血中的內(nèi)皮祖細(xì)胞來源于骨髓。從病人自體的骨髓中獲得內(nèi)皮細(xì)胞，一方面來源比較方便，而且也可以避免GVHD的發(fā)生。但是由于骨髓基質(zhì)細(xì)胞種類多，難以分離純化骨髓內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮祖細(xì)胞。本研究用本實驗室配制的內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)液（EndoM）體外培養(yǎng)小鼠骨髓細(xì)胞，分離純化骨髓內(nèi)皮細(xì)胞及內(nèi)皮祖細(xì)胞，并觀察粒巨噬系集落刺激因子（rmGMCSF）對小鼠骨髓內(nèi)皮細(xì)胞體外增殖的影響以及體外增殖后內(nèi)皮細(xì)胞增殖機能的改變，這對臨床運用內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮祖細(xì)胞治療疾病有一定的指導(dǎo)意義。

動物

昆明小鼠，由中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院動物學(xué)部提供，雌雄不限，普通飲食。

主要試劑和儀器

IMDM為Gibco公司產(chǎn)品；新生牛血清購自杭州四季清生物制品研究所；重組小鼠粒巨噬細(xì)胞集落刺激因子（rmGMCSF）為R&D公司產(chǎn)品；vWF抗體、CY3標(biāo)記的羊抗兔IgG為Sigma公司產(chǎn)品；MTT、二甲基亞砜（DMSO）為Sigma公司產(chǎn)品；酶標(biāo)儀為Awarens公司產(chǎn)品；CO2培養(yǎng)箱購自美國Forma。

小鼠骨髓內(nèi)皮細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞集落的培養(yǎng)

用頸椎脫臼法處死小鼠，在無菌條件下取出股骨，用IMDM沖出骨髓細(xì)胞，制成單細(xì)胞懸液，取1×106個小鼠骨髓單個核細(xì)胞種入1ml含有15%新生牛血清的EndoM培養(yǎng)體系，置于24孔板中，于37℃、5%CO2、飽和濕度下培養(yǎng)5天后,用胰蛋白酶消化，制成單細(xì)胞懸液，按每孔1×104個細(xì)胞種入24孔板，每組3孔。于二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)15天后計數(shù)內(nèi)皮細(xì)胞集落數(shù)，以≥50個細(xì)胞的聚合計為1個集落。

內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)觀察及vWF的檢測

培養(yǎng)的骨髓內(nèi)皮細(xì)胞集落經(jīng)WrightGiemsa染色后，顯微鏡下觀察內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)。用間接免疫熒光法檢測骨髓內(nèi)皮細(xì)胞vWF。將內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)于24孔板內(nèi)放置的蓋玻片上，當(dāng)細(xì)胞間沒有明顯的間隙時，取出蓋玻片，用PBS清洗，用4%的多聚甲醛固定30分鐘，用PBS洗3次：2%的正常羊血清封閉4小時，加入vWF抗體，4℃過夜，用PBS洗3次，加入二抗CY3IgG，37℃孵育60分鐘,PBS洗3次：置于熒光顯微鏡下觀察。以本室建的小鼠骨髓內(nèi)皮細(xì)胞株［7］為陽性對照，骨髓成纖維細(xì)胞為陰性對照。

不同濃度的GMCSF對小鼠骨髓內(nèi)皮細(xì)胞形成集落的影響

取純化的小鼠骨髓內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)于24孔板中，每孔5000個細(xì)胞，在基本培養(yǎng)體系（含1%濃度EndoM）的基礎(chǔ)上分別加入5、10、25ng/ml的rmGMCSF，對照組不加入GMCSF，每組3孔。置于CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)15天，于倒置顯微鏡下記數(shù)集落數(shù)，≥50個細(xì)胞的聚合計為1個內(nèi)皮細(xì)胞集落。

GMCSF對內(nèi)皮細(xì)胞增殖影響的MTT法測定

將純化的小鼠骨髓內(nèi)皮細(xì)胞按5000個/孔培養(yǎng)于96孔板，每孔0.2ml，每組3孔。實驗組培養(yǎng)體系中分別加入5、25、100ng/ml的rmGMCSF，對照組內(nèi)不加。在37℃、5%CO2、飽和濕度下分別培養(yǎng)5天和10天，取出培養(yǎng)板吸去培養(yǎng)液，然后加入無血清的IMDM180μl和20μlMTT溶液，放入培養(yǎng)箱孵育4小時，吸去液體，各孔加入DMSO150μl，振蕩10分鐘，使結(jié)晶充分溶解。選擇492nm波長，在酶標(biāo)儀上測定各孔的光吸收值（OD492）。

生長曲線

純化的小鼠骨髓內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)于96孔板中，每孔5000個細(xì)胞，加0.2ml含15%新生牛血清的基本培養(yǎng)液，并加入25ng/ml的rmGMCSF。共種6組，每組3孔，培養(yǎng)5天后，分別于第7、9、11、13、15天用胰酶消化后計數(shù)細(xì)胞，每次3孔，求平均值，做出生長曲線。按公式DT=t×1g2/(1gN-1gN0)算出第1代內(nèi)皮細(xì)胞生長的倍增時間。

細(xì)胞周期的流式細(xì)胞術(shù)檢測

無菌條件下取小鼠骨髓單個核細(xì)胞，按2×106個細(xì)胞種于6孔培養(yǎng)板中（2ml培養(yǎng)體系中含15%新生牛血清的EndoM），置于37℃、5%CO2、飽和濕度下培養(yǎng)5天，然后吸去培養(yǎng)液，加入兩種不同培養(yǎng)體系，對照組加含15%新生牛血清的IMDM，實驗組加15%新生牛血清的IMDM和100ng/ml的rmGMCSF，每組各10孔，置于CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)3天后，用胰酶消化細(xì)胞，200×g,離心5分鐘，用PBS洗滌細(xì)胞2次之后，用300μlPBS重懸細(xì)胞，加入冰冷的乙醇（-20℃）約700μl（終濃度為70%），將細(xì)胞放于-20℃過夜處理后，用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)

取小鼠骨髓單個核細(xì)胞，按2×106個細(xì)胞種于6孔培養(yǎng)板中（2ml體系中含15%新生牛血清的EndoM），置于37℃、5%CO2、飽和濕度下培養(yǎng)5天，然后吸去培養(yǎng)液，加入15%新生牛血清的IMDM培養(yǎng)液和100ng/ml的rmGMCSF，促使細(xì)胞融合，再按1∶4傳代于6孔板中，同樣加入15%新生牛血清的IMDM和100ng/ml的rmGMCSF，等細(xì)胞生長至融合，按1∶4傳代，加入相同培養(yǎng)體系。按上述方法傳4代后，繪制生長曲線，方法同前。公式DT=t×1g2/(1gN-1gN0)算出第4代內(nèi)皮細(xì)胞生長的倍增時間，并與第1代的倍增時間進(jìn)行比較。

統(tǒng)計學(xué)處理

實驗數(shù)據(jù)為3次結(jié)果，以mean±SD表示。不同處理組兩組間比較采用t檢驗，應(yīng)用SPSS軟件分析，P<0.05表示有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié)果

細(xì)胞形態(tài)每孔種入小鼠骨髓內(nèi)皮細(xì)胞5000個，對照組加基礎(chǔ)培養(yǎng)液,實驗組在基礎(chǔ)培養(yǎng)液的基礎(chǔ)上分別加入rmGMCSF5、10、25ng/ml。與對照組相比，實驗組集落數(shù)均明顯增多（圖3），說明rmGMCSF對小鼠骨髓內(nèi)皮細(xì)胞的增殖有明顯刺激作用。

rmGMCSF對內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響

小鼠骨髓內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)5、10天，分別進(jìn)行MTT的檢測，結(jié)果表明rmGMCSF對小鼠骨髓內(nèi)皮細(xì)胞生長促進(jìn)作用明顯，各組與對照組相比差異顯著（P<0.01）（圖4）。

GMCSF對EC細(xì)胞周期的影響

運用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期，觀察GMCSF對EC細(xì)胞周期的影響。結(jié)果顯示GMCSF使細(xì)胞進(jìn)入S期的比例為9.3%，與對照組2.1%相比有明顯差別。此結(jié)果說明GMCSF能夠促使細(xì)胞進(jìn)入S期，加快細(xì)胞的分裂，從而促進(jìn)了細(xì)胞的增殖（圖5）。Figure5.EffectofGMCSFoncellcycleofendothelialcells.A:grouptreatedbyGMCSF.B:controlgroup.

體外擴增傳代對內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響

圖6為小鼠骨髓第1代和第4代內(nèi)皮細(xì)胞的生長曲線。利用計算公式［DT=t×1g2/(1gN-1gN0)］計算出第1、4代細(xì)胞生長的倍增時間分別為30.25±0.55小時、31.67±0.26小時。第1代與第4代的細(xì)胞倍增時間相比，無明顯差異，表明經(jīng)體外擴增傳代4次，仍能保持傳代早期的增殖潛能。

Figure6.Growthcurveofthefirstandfourthpassagegenerationsofmurineboneendothelialcells.討論

國內(nèi)外對于骨髓內(nèi)皮細(xì)胞的純化報道較少，但已經(jīng)進(jìn)行了一些關(guān)于細(xì)胞因子對內(nèi)皮細(xì)胞增殖影響的研究，如Yonekura等［8］報道VEGF可以促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，Rieck等［9］則報道bFGF可促進(jìn)角膜內(nèi)皮細(xì)胞的生長。我們此前曾報道了VEGF、bFGF、SCF、IL6、GMCSF等對內(nèi)皮細(xì)胞株的增殖有促進(jìn)作用［10］。GMCSF對未經(jīng)轉(zhuǎn)化的骨髓內(nèi)皮細(xì)胞增殖的作用尚未見報道。本研究中，我們用本室配制的培養(yǎng)基在較短的時間內(nèi)純化了小鼠的骨髓內(nèi)皮細(xì)胞，vWF為陽性，并在此基礎(chǔ)上觀察了GMCSF對骨髓內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響。應(yīng)用基本培養(yǎng)基培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞集落時，形成的集落數(shù)較少，加入rmGMCSF后，集落生成明顯增多。MTT的結(jié)果亦支持GMCSF對小鼠骨髓內(nèi)皮細(xì)胞生長的刺激作用。細(xì)胞生長曲線的結(jié)果表明，在含GMCSF培養(yǎng)的條件下，內(nèi)皮細(xì)胞生長的倍增時間為30.25±0.55小時，經(jīng)4次傳代后細(xì)胞倍增時間無明顯延長，表明體外培養(yǎng)擴增4代后，細(xì)胞仍能保持早期的增殖能力，GMCSF對骨髓內(nèi)皮細(xì)胞的體外增殖有明顯刺激作用。文獻(xiàn)報道內(nèi)皮細(xì)胞表面有GMCSFR的存在，而內(nèi)皮細(xì)胞本身也可以分泌GMCSF［11］。結(jié)合細(xì)胞周期測定的結(jié)果，可以認(rèn)為，GMCSF促內(nèi)皮細(xì)胞增殖的機制可能是GMCSF與GMCSFR結(jié)合，通過細(xì)胞內(nèi)信號傳遞使更多的細(xì)胞進(jìn)入S期來實現(xiàn)的。

【參考文獻(xiàn)】

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第3篇

【關(guān)鍵詞】人乳鐵蛋白；癌細(xì)胞；細(xì)胞增殖

人乳鐵蛋白(HumanLactoferrin，hLF)是主要存在于人乳清中的球蛋白，乳汁別是初乳中含量最高，具有廣譜抗菌、抗病毒、抗腫瘤等作用。國外有學(xué)者將其應(yīng)用于腫瘤患者的治療，但是對其作用機制的研究較少。目前國內(nèi)較少有關(guān)于hLF作用于細(xì)胞的報道，我們選用易早期轉(zhuǎn)移的鼻咽癌(NPC)細(xì)胞作為研究對象，以中國倉鼠卵巢細(xì)胞(CHO)、人肝臟細(xì)胞(L02)作為正常細(xì)胞對照，觀察hLF在體外是否具有抑制癌細(xì)胞生長的作用，探討hLF抗腫瘤的作用機制，從而為腫瘤的治療提供研究基礎(chǔ)，為臨床實驗及應(yīng)用提供新的理論依據(jù)。

一、材料與方法

1.1材料人鼻咽癌細(xì)胞(CNE)、中國倉鼠卵巢細(xì)胞(CHO)、人肝臟細(xì)胞(L02)均購自中國科學(xué)院上海細(xì)胞資源中心。重組hLF(Lot:L0520，溶于PBS中，儲存濃度5mg/ml，-20℃儲存?zhèn)溆?和噻唑藍(lán)(MTT，Lot:M2128)均購自Sigma公司。RPMI1640、胎牛血清購自HyClone公司。其他試劑均為分析純。

1.2實驗方法

1.2.1細(xì)胞培養(yǎng)各細(xì)胞系均應(yīng)用含10%胎牛血清和1%青鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)基，5%CO2，37℃培養(yǎng)。

1.2.2MTT法檢測細(xì)胞增殖設(shè)空白對照組和hLF干預(yù)組。待細(xì)胞生長至對數(shù)生長期，接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，接種數(shù)為5×104/孔。每組細(xì)胞設(shè)5個平行孔，各組細(xì)胞分別加入不同濃度的hLF(0，1.25×10-3,2.5×10-3，5×10-3，10×10-3，20×10-3，40×10-3g/L)，每孔均為200μl。作用24h后，加入MTT(5g/L，每孔20μl)，繼續(xù)培養(yǎng)4h，測定A570nm吸光度。

1.2.3細(xì)胞形態(tài)觀察細(xì)胞經(jīng)hLF處理后，傾去上層懸浮死細(xì)胞并用PBS洗兩遍，加入新鮮培養(yǎng)基。同樣處理對照孔細(xì)胞，將細(xì)胞置于倒置顯微鏡下，觀察細(xì)胞形態(tài)的變化。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)據(jù)用x±s表示，組間比較用方差分析。

二、結(jié)果

2.1重組hLF對鼻咽癌細(xì)胞CNE、人肝臟細(xì)胞L02、中國倉鼠細(xì)胞CHO系的增殖能力的影響對CNE呈現(xiàn)劑量依賴性的抑制作用，而對正常細(xì)胞無抑制作用。人乳鐵蛋白對各細(xì)胞體外增殖的影響與空白對照比較:1)P<0.05

2.2細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察顯微鏡鏡下可見，空白對照組癌細(xì)胞密集成片生長，如鋪路卵石狀，細(xì)胞膜圓潤，透明，顆粒較少，細(xì)胞間界限清楚，并可隱約見到細(xì)胞核。hLF處理組癌細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯的改變，隨hLF濃度增加，細(xì)胞從正常的增殖旺盛的貼壁生長，逐漸表現(xiàn)為生長緩慢，黏附力降低，細(xì)胞變圓，細(xì)胞胞質(zhì)粗糙，細(xì)胞內(nèi)顆粒逐漸增多，且透明度降低，立體感較差，細(xì)胞形態(tài)完整性受損，而正常細(xì)胞在細(xì)胞鏡檢圖hLF作用下無顯著變化。

三、討論

hLF多種生物學(xué)功能通過免疫系統(tǒng)的激活與調(diào)節(jié)得以實現(xiàn)。Bezaul研究發(fā)現(xiàn)，乳鐵蛋白能抑制鼠實體瘤的生長和轉(zhuǎn)移。腫瘤內(nèi)注射LF，可以明顯的減小實體瘤的體積，且作用效果與LF干預(yù)天數(shù)相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，乳鐵蛋白的抗頭頸部腫瘤作用是通過抑制腫瘤細(xì)胞增殖實現(xiàn)的。Wolf等發(fā)現(xiàn)，人乳鐵蛋白通過阻斷頭頸部腫瘤細(xì)胞由G0到G1期的轉(zhuǎn)化來抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。人乳鐵蛋白對鼠的SCC細(xì)胞系生長的抑制作用，與劑量成正相關(guān)；而且人乳鐵蛋白抑制頭頸部細(xì)胞癌的作用是通過直接的細(xì)胞毒作用及系統(tǒng)性的免疫調(diào)節(jié)作用實現(xiàn)的。

Varadhachary等人做了大量的口服臨床試驗，證實乳鐵蛋白無藥物相關(guān)的有害作用。鼻咽癌作為頭頸部腫瘤之一，其惡性程度較高，早期即可出現(xiàn)頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，臨床上有轉(zhuǎn)移至骨盆、肺、肝等多器官的病例。選用鼻咽癌細(xì)胞作為研究對象，具有一定的代表意義。

本研究結(jié)果顯示，人乳鐵蛋白可以抑制鼻咽癌細(xì)胞增殖，且呈劑量依賴性，對正常細(xì)胞的增殖無明顯抑制作用。這一結(jié)果，為開發(fā)乳鐵蛋白的抗癌功效提供了理論依據(jù)。

【參考文獻(xiàn)】

第4篇

固定資產(chǎn)折舊額，是固定資產(chǎn)磨損價值貨幣表現(xiàn)，在一定時期內(nèi)提取折舊的數(shù)額，取決于固定資產(chǎn)的規(guī)模與固定資產(chǎn)的磨損程度，這是傳統(tǒng)會計核算折舊額時所遵循的原則。但在通貨膨脹、物價上漲過快的條件下，計算折舊時，除了仍應(yīng)遵循上述基本原則外，還應(yīng)當(dāng)考慮通貨膨脹、貨幣貶值的因素，因為只有這樣，才能保證所提折舊基金，能夠從使用價值上恢復(fù)原有規(guī)模。如1985年投資100萬元，購買每輛載重噸位4噸的10輛載重汽車，壽命期為10年，提取折舊100萬元，1995年這批汽車報廢，由于物價上漲，再用這100萬元折舊額就無法購買具有原使用價值的10輛載重汽車。因此，在新的條件下，折舊額應(yīng)當(dāng)要保證固定資產(chǎn)原有使用價值得以補償，這是折舊額應(yīng)當(dāng)遵循的原則之一，同時，亦是資產(chǎn)保值應(yīng)遵守的準(zhǔn)則。

二、折舊額的核算方法

（一）固定資產(chǎn)磨損價值貶值的量變規(guī)律。

為了正確地核算折舊額，即在通貨膨脹條件下，能抵補貨幣貶值的損失，在固定資產(chǎn)壽命期各個時間階段上所計算的折舊額之和，能夠滿足從使用價值上恢復(fù)原有固定資產(chǎn)規(guī)模的需要，這首先就需要分析固定資產(chǎn)磨損價值貶值的量變規(guī)律。

固定資產(chǎn)是長期使用的物質(zhì)資料，而生產(chǎn)性的固定資產(chǎn)是物質(zhì)產(chǎn)品生產(chǎn)過程中的勞動資料。因而，固定資產(chǎn)再生產(chǎn)的過程是：

購置建造一交付使用一報廢一再購置建造。

從上述過程可以看出：建（購）置是固定資產(chǎn)原始價值的始點，報廢是固定資產(chǎn)原始價值的終點。在壽命期中，固定資產(chǎn)每年在提取折舊后，其金額必要產(chǎn)生一個無形貶值量。這個貶值量的變化過程可用公式表示如下：

式中：Z代表固定資產(chǎn)原值；Z’代表貨幣貶值的損失量；Y代表年折舊額；L代表物價上漲率；l，2…n代表時序；n代表固定資產(chǎn)使用年限。

在通貨膨脹條件下，為了避免固定資產(chǎn)貶值的損失，在核算折；日時，應(yīng)當(dāng)把貶值（Z’）加到折舊額中，進(jìn)入產(chǎn)品成本，待產(chǎn)品出售后，收回折舊以滿足更新固定資產(chǎn)的需要。

（二）核算折舊的公式設(shè)想。

上面從遞減折舊的觀點，考察固定資產(chǎn)逐年遞減的貶值量的變化規(guī)律的，但為了正確計算年折舊額，可以從另外一個角度觀察這個問題，即一方面以整個固定資產(chǎn)原值為基數(shù)，隨著時間的推移，由于通貨膨脹，貨幣貶值，可把逐年貶值量加到固定資產(chǎn)原值中去，使固定資產(chǎn)從其生命的始點到生命的終點，仍能保值。另一方面每年提取的折舊額，從第～年末開始，直至折舊終止為止亦逐年加進(jìn)一個貶值額，并假定固定資產(chǎn)在報廢時無殘值，則可建立如下公式：

把上述方程作為如下整理，則：

整理后簡得：

現(xiàn)仍以本文前面購買10輛汽車為例：

Z=100萬元，n=10年

則該批汽車的年折舊額為：

計算結(jié)果，每年提取13．8909萬元，在10年物價總水平上升87．186%的條件下，在10年后仍然能夠購買載重量為4噸的10輛載重汽車。然而按傳統(tǒng)的方法計算折舊，即100萬元10年=10萬元，在通貨膨脹條件下，所計算的折舊總額，是無法按照原有固定資產(chǎn)使用價值規(guī)模更新全部固定資產(chǎn)，即無法保證固定資產(chǎn)保值的。

三、核算折舊額的幾個具體問題

通過實例證明，筆者認(rèn)為上面所設(shè)計并經(jīng)過推導(dǎo)，論證所建立的在通貨膨脹條件下，計算折舊額的公式是科學(xué)的，但在應(yīng)用公式時，仍有下列問題需做進(jìn)一步的研究。

（一）價格指數(shù)的選擇。

通貨膨脹，物價上漲，這是一個普遍的問題。但在現(xiàn)實經(jīng)濟生活中，由于各種商品在國計民生中的作用不同，因而其物價上漲幅度是不相同的。因此，在我國實際工作中編制有各種性質(zhì)的價格指數(shù)。那么在計算固定資產(chǎn)折舊額時，應(yīng)當(dāng)采用哪種價格指數(shù)為宜呢？筆者認(rèn)為，應(yīng)當(dāng)采用國家統(tǒng)計局編制的固定資產(chǎn)投資價格指數(shù)。這一指數(shù)綜合反映我國固定資產(chǎn)投資價格的變動程度，而且與折舊額的聯(lián)系最為密切。

（二）固定資產(chǎn)貶值率總額。

固定資產(chǎn)折舊的計算是一個十分重要經(jīng)濟問題，它關(guān)系到正確評價企業(yè)經(jīng)濟效益與國家財政收入等問題。因此國家財政部門應(yīng)當(dāng)根據(jù)固定資產(chǎn)投資價格總指數(shù)與分類指數(shù)，考慮到未來一段時期內(nèi)經(jīng)濟發(fā)展的趨勢，對價格變動作出預(yù)測，并以定額參數(shù)的形式公布，供各企業(yè)計算折舊時采用。當(dāng)然我們不否認(rèn)制定定額參數(shù)即貨幣貶值的定額參數(shù)是十分復(fù)雜的工作。但為了保證這項工作的準(zhǔn)確性與科學(xué)性，可以在預(yù)測的基礎(chǔ)上經(jīng)有關(guān)專家討論，爾后經(jīng)有關(guān)權(quán)威機構(gòu)批準(zhǔn)，再行公布采用。

（三）定額貶值率與實際貶值率的問題。

貨幣定額貶值率與實際貶值率是要發(fā)生離差的，因此，根據(jù)定額貨幣貶值率計算的折舊額和實際貨幣貶值率計算的數(shù)值之間，必須要產(chǎn)生一個差數(shù)，為此需要調(diào)整。一般來講，在年度執(zhí)行過程中，可按貨幣定額貶值率計算，待年終決算時，再根據(jù)實際貨幣貶值率進(jìn)行調(diào)整，其公式如下：

YI=Y[l＋（L1－L）]

式中：YI代表調(diào)整后的折舊額；Y代表按貨幣定額或預(yù)計貶值率折舊額；LI代表實際貨幣貶值率；L代表定額貨幣貶值率。

設(shè)Y=13．8909萬元；L1＝0．07；L＝0．0647

第5篇

患兒11例，平均年齡2-4歲，11例患兒的臨床表現(xiàn)依次為:淋巴結(jié)腫大(76%，19/25)，肝脾腫大(72%，18/25)，皮疹(60%，15/25)，骨質(zhì)浸潤(52%，13/25)，貧血(52%，13/25)，發(fā)熱(52%，13/25)，肺部浸潤(44%，11/25)。實驗室檢查血象、骨髓像、肺部x線缺乏特異性表現(xiàn);骨骼X線病變以溶骨性骨質(zhì)破壞多見;頭顱CT/MRI為診斷顱底骨質(zhì)破壞和蝶鞍病變的重要方法?；純捍_診為朗細(xì)胞組織細(xì)胞增生癥。

治療

本病屬于免疫系統(tǒng)疾病，治療該病癥必須增強免疫力，可以注射"免疫抑制劑"治療。

2護理

護理計劃及早制定。患兒所患一種罕見的疾病，盡快確診，積極配合醫(yī)生迅速和有效地使所有援助檢查，皮膚科，兒科和其他科室會診。對這種嚴(yán)重的疾病評估，獲取相關(guān)信息，并與醫(yī)生的治療方案，孩子們組織討論，制定了詳細(xì)的護理計劃，認(rèn)真落實和不斷改進(jìn)的條件，并根據(jù)合理的謹(jǐn)慎措施轉(zhuǎn)變。

2.1發(fā)燒護理  密切觀察體溫變化，每天6次測量體溫恢復(fù)正常后3天，每天一次衡量，臥床休息，補充營養(yǎng)和液體的溫度后，及時更換汗?jié)褚路?，以防止滴濕疹的發(fā)生。

 

2.2心理護理  兒童有康復(fù)的強烈愿望，通過耐心說服，消除恐懼的治療，治療可以有意識地給予精神上安慰。為家長密切合作進(jìn)行治療。

 

2.3 高蛋白飲食和營養(yǎng)，高維生素，好食物和合理的原則，以改善機體健康。增加人體的耐受化療，提高免疫力。特殊治療時，如嘔吐，嚴(yán)重且難以考慮飲食或靜脈高營養(yǎng)消耗的元素，以確保病人有足夠的熱量，改善營養(yǎng)狀況。

2.4病人的病情在手術(shù)前仔細(xì)觀察，觀察腹部疼痛，位置，范圍，腹脹情況排氣排便情況的性質(zhì)，使快速，皮膚準(zhǔn)備，術(shù)前皮膚測試等，禁用止痛藥，以防掩蓋病情。

2.5 患者手術(shù)后回到病房，以枕平臥4?6小時，頭側(cè)面，保持呼吸通暢，必要時給予吸氧。麻醉前作出明確，監(jiān)測有無嘔吐，腹脹，排氣排便情況，保持引流通暢胃腸減壓生命體征及腹部癥狀密切觀察，并觀察引流液，顏色和數(shù)量的性質(zhì);禁止在食品，良好的口腔護理，根據(jù)醫(yī)生的意見合理補充水分和電解質(zhì)溶液;術(shù)后早期的半臥位，鼓勵早期活動，防止腸粘連，這將有利于身體恢復(fù);蠕動恢復(fù)。適當(dāng)?shù)娘嬍硲?yīng)少量多餐，逐漸結(jié)束，并觀察是否進(jìn)食后腹痛，腹脹，嘔吐等癥狀，如果上述癥狀，應(yīng)暫停進(jìn)食，看看是否有腸梗阻，吻合口狹窄等并發(fā)癥;該觀察傷口無出血，滲液，腫脹，保持傷口敷料清潔干燥，防止尿液污染傷口。

2.6藥物不良反應(yīng)及護理   對化療藥物的胃腸道不良反應(yīng)的各種觀測是普遍的。在化療前或口服止吐藥物化療期間的飲食，以減少惡心和嘔吐，靜脈注射30分鐘要輕和消化。做三查七對的。（1）長春新堿導(dǎo)致末梢神經(jīng)炎，皮膚，肌肉和關(guān)節(jié)四肢麻木，疼痛，腹痛，肝，腎功能表現(xiàn)應(yīng)該是保護，注意血液中的變化，低白血細(xì)胞分離應(yīng)該很好對各種感染的保護;（2）高劑量甲氨蝶呤結(jié)合6 - MP的時間。使胃腸道反應(yīng)，口腔炎，口腔潰瘍惡化。重要的骨髓抑制，國會議員在6個半小時，晚飯后口服，每日一次，以減輕反應(yīng)，同時加強口腔護理，甲氨蝶呤輸液，可能含有冰或冷水，以減少口腔黏膜和菜，氨濃度的甲氨蝶呤（3）VP16的使用，應(yīng)密切觀察有無泄漏，一旦發(fā)現(xiàn)，應(yīng)立即停止輸液，以避免組織壞死和（或）血酸靜脈炎。 16輸液的副總裁會引起性低血壓，它會促使孩子說謊，緩慢的速度靜脈滴注。

密切觀察病情變化，為爭取更多的搶救時間。密切觀察生命體征。啟用多功能心電監(jiān)護儀密切監(jiān)測呼吸，心率，血氧變化，所以在氧氣下降，及時救護。關(guān)閉的體溫，體溫過高，及時物理降溫，低溫，溫暖的加強，觀察使溫度維持在正常范圍內(nèi)，四肢溫暖。遵守一般條件。皮膚兒童，所有的重要器官損傷，嚴(yán)重的疾病，快速，并密切觀察皮膚出血，皰疹比以前或加重更好;肝臟是放大或縮小趨勢;觀察的臉部，嘴唇，身體膚色，反應(yīng)和尿色;觀察胃腸道出血：留置胃管，觀察出血，患兒棕色胃胃內(nèi)容物后退出了0.6個百分點后，蘇打水洗胃凝血酶鼻飼的效果，但病情反復(fù)。由于消化道出血，偶爾空腹的患兒，有低血糖的風(fēng)險，血糖監(jiān)測跟蹤，使低血糖的及時修正。血液生化檢驗顯示低血清鈣，補鈣時間，以防止鈣抽搐。皮膚，粘膜的護理。與身體皮膚，頭發(fā)，手，有出血，紫癜蓋腳，兒童大量散在皰疹，皰疹損壞個人，每天1:15000高錳酸鉀溶液擦洗，動作輕柔，穿著柔軟的衣服，以免加重皮膚病變，破損的皮膚涂上百多邦?？谇挥脽o菌生理鹽水進(jìn)行常規(guī)口腔護理，以減少感染?；純涸陝訒r易擦傷足跟部，用無菌紗布加以包扎。加強臀部護理，大小便后及時更換吸濕性好、柔軟的尿褲，保持全身皮膚清潔干燥。適時翻身，以免局部長期受壓。

第6篇

經(jīng)過全面、細(xì)致的一輪復(fù)習(xí)后，學(xué)生已基本掌握了教材知識，作為二輪復(fù)習(xí)的重點則應(yīng)切實加強對新課程標(biāo)準(zhǔn)和2012年考試說明的研究，以此制定復(fù)習(xí)目標(biāo)，這樣復(fù)習(xí)才有針對性和實效性。如：2012年考試說明中對細(xì)胞增殖內(nèi)容的要求。

從近幾年的高考來看，命題重點圍繞細(xì)胞周期中染色體行為和數(shù)目變化規(guī)律，減數(shù)分裂與有絲分裂的比較及圖像識別，減數(shù)分裂的過程及與遺傳的關(guān)系。那么學(xué)生在這塊內(nèi)容中到底還有哪些未落實到位？又該如何幫助學(xué)生有效解決這些問題？

一、典型錯誤分析

【典例】圖為雄果蠅體內(nèi)某細(xì)胞分裂過程中，每條染色體上DNA含量變化(甲曲線)和染色體數(shù)目變化(乙曲線)。請據(jù)圖回答：

(1) CD段細(xì)胞中有( )條染色體，DE段有染色單體( )條，F(xiàn)G段細(xì)胞中有DNA( )個，DE段可形成四分體( )個。

(2)在A點若用3H標(biāo)記該細(xì)胞的DNA雙鏈，再將其轉(zhuǎn)入不含3H的培養(yǎng)基中

培養(yǎng)，在FG段一個細(xì)胞中的染色體總數(shù)和被3H標(biāo)記的染色體數(shù)分別為( ) ( )。

(3)若該細(xì)胞基因型為AaXbY，在分裂完成后產(chǎn)生了一個AYY的，則另三個的基因型分別為( )( )( )。

(4)該細(xì)胞某一條染色體的兩條單體相同位點出現(xiàn)不同基因的變化可發(fā)生在( )段。

該題考查目標(biāo)：有絲分裂與減數(shù)分裂的曲線辨析，減數(shù)分裂中染色體、DNA、單體的數(shù)目變化規(guī)律，染色體、DNA、脫氧核苷酸鏈之間的關(guān)系，及減數(shù)分裂與生物變異的聯(lián)系。通過學(xué)案反映出學(xué)生存在以下幾方面的問題：

1.基礎(chǔ)知識不扎實，記憶不牢，知識點混淆。例如：在第(1)小題中學(xué)生由于把果蠅染色體數(shù)4對記成了4條從而造成CD段錯寫為含4條染色體。由于不明確四分體的概

(3)糾錯補偏，反思內(nèi)化。有一句教育的真理“世界上最有價值的習(xí)題不是專家出的習(xí)題，而是自己做錯的習(xí)題”。二輪復(fù)習(xí)抓錯題相當(dāng)機的導(dǎo)航燈一樣，它可以幫我們指明前進(jìn)的方向。學(xué)生在一輪復(fù)習(xí)中已做了大量試題，經(jīng)歷了多次模擬考試，難免出現(xiàn)許多錯誤，若能指導(dǎo)學(xué)生將這些錯誤進(jìn)行分類整理，就會發(fā)現(xiàn)反復(fù)出錯的地方就是自己知識上的薄弱環(huán)節(jié)，這時就可針對性地翻閱書本，結(jié)合書本來解決知識漏洞，當(dāng)然有些錯誤可能是學(xué)生不注意使用生物科學(xué)術(shù)語回答，畫圖表、寫實驗設(shè)計不規(guī)范嚴(yán)謹(jǐn)?shù)仍斐傻模ㄟ^糾錯也可有效提醒學(xué)生對自己這方面問題的關(guān)注。

二輪復(fù)習(xí)不做題不行，但沉迷于題海也不行，關(guān)鍵要提高做題質(zhì)量?？偨Y(jié)歸納常見題型的解題規(guī)律、方法技巧，從而達(dá)到弄懂一道題，旁通一類題的目的。也可通過演練近幾年的高考真題親身感觸高考題的命題思路、設(shè)問方式，從中感悟解題技巧。

3.消除情感夢魘，增強自信。 美國著名心理學(xué)家Robert Rosenthal曾做過這樣一個實驗：他從某個班級的花名冊中隨意挑選了幾個名字，并且告訴老師這些學(xué)生經(jīng)過測試智商較高。之后，老師便關(guān)注并鼓勵他們，這些學(xué)生也由于有了自信而努力學(xué)習(xí)。八個月之后，那些“高智商”的學(xué)生的成績竟有了驚人的進(jìn)步。這個實驗證實了自信的重要性。那么如何增強學(xué)生對考試的自信，以實現(xiàn)從容應(yīng)考呢？

(1)充分的考前準(zhǔn)備：多數(shù)學(xué)生都有這樣的體會：“一看到考題不難，緊張不安的情緒便會隨之減少，腦子不再麻木，思維也變得靈活了?！币虼耍记耙欢ㄒ龊弥R與技能雙重準(zhǔn)備，并針對考試中可能出現(xiàn)的復(fù)雜情況，進(jìn)行有目的的訓(xùn)練，做到胸有成竹，考試當(dāng)然也充滿信心。

(2)適當(dāng)?shù)男睦碚{(diào)節(jié)：既要正確對待壓力，但也不能給自己增加壓力。不過多去想考試成敗將會給自己帶來什么后果，尤其不夸大考試成敗的影響，樹立“天生我材必有用”的廣闊意境。

第7篇

【摘要】文章對生產(chǎn)制造企業(yè)價值鏈及價值鏈分析理論進(jìn)行總結(jié),指出價值鏈分析在制造企業(yè)內(nèi)部物流成本管理中的運用有極強的優(yōu)越性。

【關(guān)鍵詞】價值鏈分析;制造企業(yè);內(nèi)部物流成本管理;運用

物流成本作為企業(yè)“第三利潤源泉”,倍受各方的關(guān)注。物流成本管理的意義在于:通過對物流成本的有效把握,利用物流要素之間效益背反關(guān)系,科學(xué)、合理地組織物流活動,加強對物流活動過程中費用支出的有效控制,降低物流活動中的物化勞動和活勞動的消耗,從而達(dá)到降低物流總成本,提高企業(yè)和社會經(jīng)濟效益的目的。

目前,造成中國物流成本居高不下的關(guān)鍵因素是制造業(yè),困擾商品流程優(yōu)化的還是制造業(yè)。為了提高制造業(yè)的競爭力,要求從業(yè)人員能夠?qū)υ牧?、半成品、產(chǎn)成品以及相關(guān)的信息流動做到7R,即正確的產(chǎn)品、正確的質(zhì)量、正確的條件、正確的顧客、正確的地方、正確的時間、正確的成本。這也正是現(xiàn)代物流管理的實質(zhì)。制造企業(yè)的物流成本管理中引入價值鏈理論,能對企業(yè)內(nèi)部物流作業(yè)流程進(jìn)行持續(xù)改善,以消除不必要的作業(yè);通過對物流成本進(jìn)行評價,分析確立物流成本控制環(huán)節(jié),有利于幫助企業(yè)降低物流作業(yè)成本。

一、價值鏈及價值鏈分析方法

信息技術(shù)的廣泛應(yīng)用,使企業(yè)從價格競爭、產(chǎn)品競爭和個體競爭轉(zhuǎn)向價值競爭、服務(wù)競爭和網(wǎng)絡(luò)競爭,而持續(xù)的核心競爭優(yōu)勢對于企業(yè)后一種情況的競爭具有更加重要的戰(zhàn)略意義。價值鏈作為確定企業(yè)核心競爭優(yōu)勢的一種基本工具應(yīng)運而生。它是一種系統(tǒng)性研究企業(yè)競爭優(yōu)勢的方法,其核心內(nèi)容是分解企業(yè)價值鏈、確定價值活動成本,以價值最大化為目標(biāo)重構(gòu)價值鏈,建立其優(yōu)化結(jié)構(gòu),從而提升企業(yè)的核心競爭優(yōu)勢。價值鏈的優(yōu)化研究經(jīng)歷了從邁克爾·波特的傳統(tǒng)價值鏈、Peter·Hines的“集成物料價值的運輸線”、JefferyF1Rayport和JohnJ1Sviokla的虛擬價值鏈,再到價值網(wǎng)理論的一個長期過程。

價值鏈已經(jīng)發(fā)展成為當(dāng)代網(wǎng)絡(luò)經(jīng)濟環(huán)境下的一種組織戰(zhàn)略思想和模式,它是以企業(yè)儲運、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)等業(yè)務(wù)流程為載體,以實現(xiàn)顧客價值最大化為直接目標(biāo)而形成的企業(yè)內(nèi)部價值活動的系統(tǒng)性結(jié)構(gòu),為企業(yè)形成信心競爭優(yōu)勢、創(chuàng)造長期利潤提供了一種系統(tǒng)的、動態(tài)的分析方法。

(一)生產(chǎn)制造企業(yè)的價值鏈

現(xiàn)代企業(yè)管理思想認(rèn)為企業(yè)是一個為最終滿足顧客需要而設(shè)計的一系列作業(yè)的集合體,企業(yè)本身就是一個由此及彼、由內(nèi)到外的作業(yè)鏈,每完成一項作業(yè)要消耗一定的資源,而作業(yè)的產(chǎn)生又形成一定的價值,轉(zhuǎn)移到下一個作業(yè),依此轉(zhuǎn)移,直至形成最終產(chǎn)品,提供給企業(yè)外部顧客。而最終產(chǎn)品作為企業(yè)內(nèi)部作業(yè)鏈的最后一環(huán),凝結(jié)了各個作業(yè)鏈所形成并最終提供給顧客的價值。因此,作業(yè)鏈同時又表現(xiàn)為價值鏈,作業(yè)耗費與作業(yè)產(chǎn)出配比的結(jié)果,就是企業(yè)的盈利。價值鏈由多個作業(yè)組成,價值鏈內(nèi)信息的傳遞基本上具有雙向特征。根據(jù)價值鏈各個環(huán)節(jié)的特征,價值鏈可分為外部價值鏈和內(nèi)部價值鏈。外部價值鏈包括企業(yè)、供應(yīng)商、客戶等;內(nèi)部價值鏈主要包括生產(chǎn)活動的作業(yè)活動等。

(二)內(nèi)部價值鏈分析

低成本是企業(yè)取得任何競爭優(yōu)勢的有利保障。企業(yè)應(yīng)在營造企業(yè)核心競爭力的前提下,對內(nèi)部價值鏈進(jìn)行分析,主要是為了解決降低企業(yè)內(nèi)部成本問題。而這些分析工作都是以“作業(yè)”為中心,在整個過程中還須結(jié)合事前管理的統(tǒng)籌規(guī)劃、事中管理的實時控制和事后管理的分析考評,以確認(rèn)企業(yè)的價值活動有哪些,處于什么樣的分布狀態(tài),并將每個價值活動所耗費的成本與對產(chǎn)品價值的貢獻(xiàn)相比較,根據(jù)企業(yè)各個作業(yè)活動在價值增值中的不同作用,將其進(jìn)行細(xì)分并采取措施加以改進(jìn)。

內(nèi)部價值鏈分析是將從基本的原材料到企業(yè)最終用戶之間的價值鏈分解成作業(yè)活動,以便理解成本的性質(zhì)和差異產(chǎn)生的原因,通過差別分析和成本分析,找出企業(yè)在價值生產(chǎn)過程中的利弊。企業(yè)為了實現(xiàn)其“股東價值最大化”的經(jīng)營目標(biāo),必須提高其作業(yè)產(chǎn)出,減少作業(yè)耗費,但并非所有的作業(yè)都能夠創(chuàng)造價值,這就需要溯本求源,分析哪些作業(yè)能夠增加價值,哪些作業(yè)不能增加價值,并盡可能消除不能創(chuàng)造價值的作業(yè),即使能創(chuàng)造價值的作業(yè),也應(yīng)盡可能減少其作業(yè)耗費,這一切都要借助于作業(yè)分析。為此,作業(yè)管理(Activity-basedManagement簡稱ABM)作為一種現(xiàn)代企業(yè)管理方法由此產(chǎn)生,作業(yè)分析主要過程如下:

1.確定作業(yè)。確定企業(yè)的價值生產(chǎn)過程,根據(jù)作業(yè)對競爭優(yōu)勢的貢獻(xiàn)大小區(qū)分作業(yè),從而確定產(chǎn)品或服務(wù)的總成本構(gòu)成。

2.評估作業(yè)。識別各過程的中間環(huán)節(jié),從而確定獲得相關(guān)成本優(yōu)勢的機遇。每項物流作業(yè)之間不是完全獨立的,在同一條價值鏈上是相互依賴的。例如,企業(yè)產(chǎn)品制造的實現(xiàn)必須依賴于原材料的儲備以及運輸,而這種相互之間的依賴性有時也會造成一些不必要的重復(fù)操作,從而影響整體的效率以及效益。因此,通過價值鏈分析法辨別出冗余環(huán)節(jié),按各個作業(yè)活動在價值增值中的作用不同,將其細(xì)分為直接增值作業(yè)活動、輔助增值作業(yè)活動、非增值作業(yè)活動和逆增值作業(yè)活動,從而確定價值創(chuàng)造過程中的核心環(huán)節(jié)。

3.優(yōu)化作業(yè)。通過對作業(yè)活動的評估,擬定改進(jìn)方案。對于直接增值作業(yè)活動,應(yīng)在保持其增值效果不降低的前提下,盡可能提高運行效率,減少資源耗費和占用;對于輔助增值作業(yè)活動,有必要在維持其輔助作用不變的情況下,盡可能減少資源占用;對于非增值作業(yè)活動和逆增值作業(yè)活動,則應(yīng)盡可能減少和避免,達(dá)到優(yōu)化作業(yè)的目的。

同時,管理深入到作業(yè)水平,進(jìn)行作業(yè)分析,就要求變革傳統(tǒng)的成本計算,使其與之相適應(yīng),即要求成本計算深入到每一作業(yè),進(jìn)行作業(yè)成本計算。由此,基于企業(yè)價值鏈的作業(yè)成本法應(yīng)運而生。

二、價值鏈分析在制造企業(yè)內(nèi)部物流成本管理中的運用

對于生產(chǎn)制造型企業(yè)來講,生產(chǎn)制造賦予了最終商品的大部分價值,是企業(yè)的核心業(yè)務(wù)單元。另外,現(xiàn)代的制造型企業(yè)在不斷加大生產(chǎn)力度的同時也十分注重客戶的售后服務(wù),不斷加大其在產(chǎn)品價值增值過程中的作用,從而逐漸地形成企業(yè)的核心競爭力。

企業(yè)的物流過程從價值鏈角度分析,不但有利于節(jié)省自身的業(yè)務(wù)運作時間、合理利用資源,而且有利于為最終的顧客提供最有價值的服務(wù),在企業(yè)的物流鏈上找到價值增值過程中貢獻(xiàn)最大的核心環(huán)節(jié)。同時,利用價值鏈分析法企業(yè)的物流活動也不再簡單地以全面削減成本為目的,而是在各價值生產(chǎn)過程中降低成本、提高效率。

制造業(yè)企業(yè)內(nèi)部物流主要包括:供應(yīng)物流,即上游企業(yè)對本企業(yè)所需物資供應(yīng)的物流活動;原材料、零配件部件物流,即企業(yè)內(nèi)部所需要原材料、零配件部件從供應(yīng)倉庫或者上游企業(yè)直接供應(yīng)到生產(chǎn)線的物流活動;半成品物流,即生產(chǎn)過程中的半成品從上一道工序(或車間)到下一道工序(或車間)的物流活動;產(chǎn)成品物流,即生產(chǎn)出的成品或最終產(chǎn)品,從生產(chǎn)線到產(chǎn)成品倉庫或者直接到下游企業(yè)的物流活動;回收物流,即生產(chǎn)過程中的廢棄物丟棄或再生所發(fā)生的物流活動。

內(nèi)部物流的合理化可以促進(jìn)生產(chǎn)過程中資源配置的合理化和工藝流程的合理化,從而大大提高制造業(yè)企業(yè)的競爭力。目前,許多企業(yè)已經(jīng)開始意識到內(nèi)部物流管理對于降低成本、提高物流效益,改善企業(yè)管理的重要作用,紛紛優(yōu)化企業(yè)內(nèi)部物流管理,建立內(nèi)部物流部門,對訂單、庫存、運輸、倉儲、加工等物流各環(huán)節(jié)或全過程實施高效的管理計劃和控制,促進(jìn)企業(yè)可持續(xù)發(fā)展,增強企業(yè)核心競爭力。

但現(xiàn)有企業(yè)內(nèi)部的物流管理存在著許多軟肋與制約:

一是傳統(tǒng)的管理理念、機制、方式等影響企業(yè)內(nèi)部物流效率的提高。轉(zhuǎn)二是企業(yè)內(nèi)部物流環(huán)節(jié)縱、橫向聯(lián)合薄弱。

三是物流成本核算缺乏財務(wù)標(biāo)準(zhǔn),責(zé)任主體不清,物流管理效益難以凸現(xiàn)。

四是對現(xiàn)代物流的研究較滯后,缺乏專業(yè)人才,實際操作經(jīng)驗少等。

三、基于價值鏈分析方法的優(yōu)越性

基于價值鏈分析的成本觀是成本管理從價值保證和價值增加兩個視角來進(jìn)行的。由此,價值鏈成本管理實際上也就具有了雙重的性質(zhì):一是控制資源的必要而足夠的投入,從而保證顧客價值(表現(xiàn)為保證提供合格產(chǎn)品);二是控制資源的耗費,以提供盡可能多的顧客價值(表現(xiàn)在保證質(zhì)量前提下的較低價格)。

通過價值鏈分析,對外能識別并確保企業(yè)在行業(yè)或產(chǎn)業(yè)中的優(yōu)勢地位和核心地位,從而能夠在整體價值鏈顧客價值最大化的前提下,通過價值讓渡等方式結(jié)成戰(zhàn)略聯(lián)盟而形成優(yōu)勢價值鏈聯(lián)盟,以使企業(yè)確保自身的優(yōu)勢戰(zhàn)略定位;對內(nèi)運用價值鏈分析法來考察企業(yè)各項活動及其相互關(guān)系,能夠盡可能消除不增加價值的作業(yè),降低可增加價值作業(yè)的資源消耗,能更全面地分析企業(yè)成本的構(gòu)成,從而避免使用傳統(tǒng)成本管理方法的缺陷。

因此,基于價值鏈的成本管理具有以下優(yōu)勢:

(一)充分考慮了降低成本的相對性問題

成本的降低有絕對成本降低和相對成本降低之分。絕對成本降低是通過一定的途徑使成本的發(fā)生額低于一定的水平(標(biāo)準(zhǔn)或預(yù)算);相對成本降低是將成本與作業(yè)的質(zhì)量、效率以至最終與企業(yè)效益聯(lián)系起來,它并不單純追求成本絕對額的降低,而是追求成本效益的不斷提高。

(二)抓住了成本管理的關(guān)鍵即作業(yè)問題

基于價值鏈的成本管理從研究導(dǎo)致成本發(fā)生的作業(yè)及作業(yè)結(jié)構(gòu)開始,通過對作業(yè)及作業(yè)結(jié)構(gòu)的優(yōu)化、改造來達(dá)到提高成本效益的目的,因而這種成本管理抓住了成本問題的關(guān)鍵。

(三)擴大了傳統(tǒng)成本管理的控制范圍

基于價值鏈的成本管理在研究成本問題時不僅要考察生產(chǎn)作業(yè),還要考察非生產(chǎn)作業(yè);不僅考察基本作業(yè),還要考察輔助作業(yè);不僅要考察本企業(yè)的價值鏈,而且要考察競爭對手、供應(yīng)商、銷售渠道、顧客甚至整個行業(yè)的價值鏈,以尋求廣泛提高本企業(yè)成本效益的途徑。

(四)更為全面地考慮了成本管理中的相關(guān)問題

基于價值鏈的成本管理追求的是整個價值鏈效益的優(yōu)化,這就要求成本管理須正確處理作業(yè)與作業(yè)之間,業(yè)務(wù)流程與業(yè)務(wù)流程之間,本企業(yè)價值鏈與供應(yīng)商、銷售渠道之間的關(guān)系;要求通過優(yōu)化這些關(guān)系來提高整個價值鏈的效益,而不能為獲得局部利益損害整體利益,也不能為了短期利益而損害長期利益。

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